Citoesqueleto microtubular del ciliado psicrófilo "Euplotes focardii"organización, isotipos y modificaciones postraduccionales de tubulina

  1. Arregui García-Rovés, Lucía
Dirigida por:
  1. Susana Serrano Barrero Directora
  2. José Manuel Andreu Morales Director/a

Universidad de defensa: Universidad Complutense de Madrid

Año de defensa: 2000

Tribunal:
  1. María del Socorro García Barrutia Presidenta
  2. Almudena Guinea Díaz Secretaria
  3. Isabel Barasoain Blasco Vocal
  4. Antonio I. Torres Rueda Vocal
  5. Maria Jesus Martin Sanchez Vocal
Departamento:
  1. Genética, Fisiología y Microbiología

Tipo: Tesis

Resumen

Los microtúbulos, elementos del citoesqueleto eucariótico, están implicados en una variedad de funciones tales como la división celular, el transporte intracelulary posicionamiento de orgánulos y la locomoción. Sin embargo, su estabilidad y actividad pueden resultar afectadas por el frío. Por debajo de los 4 grados C, parte de los microtúbulos de organismos unicelulares como Paramecium, o de células neuronales de mamífero se despolimerizan y producen fracciones solubles e insolubles. Euplotes focardii es un ciliado hipótrico psicrófilo, aislado del continente antártico a temperaturas que oscilan entre -1,8 grados C y 2 grados C; en este organismo todas las estructuras microtubulares permanecen estables al frío. Con la finalidad de contribuir a una mayor comprensión de las causas de las diferencias en estabilidad de los microtúbulos al frío hemos caracterizado los sistemas microtubulares y la tubulina de E. focardii. Se ha empleado, para ello, una batería de anticuerpos que reconocen específicamente secuencias evolutivamente conservadas de Alfa y de Beta tubulina, y modificaciones postraduccionales de esta proteína. Mostramos que estas regiones de la proteína (con un posible papel funcional en la formación de los microtúbulos) están presentes en este organismo y que las células de E. focardii contienen tubulina acetilada, poliglutamilada y fosforilada. Además, se han obtenido anticuerpos policlonales frente a los distintos isotipos que componen la familia multigénica (cuatro genes) de la Beta tubulina de este ciliado, demostrando que todos ellos se expresen y que forman parte de los microtúbulos de este organismo. Asímismo, al menos uno de los isotipos, denominado Beta t3, presenta una función específica y una expresión diferencial en el ciclo celular: está presente en los cuerpos basales (estructuras que funcionan en protozoos comocentros organizadores de microtúbulos), y por tanto puede estar imp