Desarrollo y validación de un modelo "in vitro" de biopelícula oral

Resumen

Las bacterias, en la naturaleza, se presentan bajo dos fenotipos de crecimiento, como bacterias planctónicas o de libre flotación, o bien asociadas en biopelículas o biofilms, es decir, agregadas en colonias de microorganismos sésiles, siendo esta última la forma más habitual de su crecimiento.Las biopelículas bacterianas son ubicuas, siendo la cavidad oral humana uno de los nichos ecológicos más favorables para su desarrollo y maduración. La boca es un hábitat cálido y húmedo, susceptible de ser colonizado por una gran variedad de microorganismos, que incluye virus, micoplasmas, arqueas, hongos, protozoos y bacterias, siendo este último grupo el más numeroso, con aproximadamente 1200 taxones bacterianos presentes. Las bacterias, en su mayoría transportadas pasivamente a la superficie a colonizar por la saliva o el fluido gingival crevicular, se van a encontrar diferentes superficies de contacto donde establecerse y desarrollar biopelículas, como son los dientes, las mucosas, con tejidos blandos queratinizados y no queratinizados, o superficies de implantes. Entre estas superficies, los dientes presentan una peculiaridad única en el cuerpo humano, y es que se trata de superficies rígidas y no descamativas, lo que facilitará la formación de biopelículas, denominadas genéricamente placa dental o placa bacteriana.Pese a que numerosos estudios de investigación están aplicando y desarrollando nuevas técnicas de cultivo y de biología molecular como parte de un esfuerzo para describir el microbioma oral, todavía estamos en los escalones de entrada en términos de la comprensión del funcionamiento de estas comunidades orales microbianas organizadas en biopelícula, debido a la heterogeneidad y la complejidad de estas biopelículas y a la dificultad del estudio in vivo de la placa dental. Por ende, la biopelícula oral, concretamente la placa dental, es el agente etiológico de algunas de las enfermedades más prevalentes del ser humano, como son las enfermedades periodontales y la caries, además de estar relacionado con enfermedades sistémicas. A todo esto se suma la resistencia de las bacterias en biopelícula a tratamientos antimicrobianos, que es casi 1000 veces superior que en estado planctónico.Por ello, y dada la gran implicación de las biopelículas orales en el desarrollo de enfermedad, es necesario estudiar el comportamiento de las bacterias orales en biopelícula para poder establecer estrategias terapéuticas adecuadas a las enfermedades derivadas de su acción. Teniendo en cuenta que resulta muy difícil la investigación de las biopelículas orales in vivo, así como conseguir un modelo de placa oral reproducible desde placa recogida de pacientes, y que son pocos los modelos multiespecies disponibles que reproduzcan las condiciones ambientales de la placa dental, en el presente trabajo se desarrolla y valida un modelo de biopelícula oral in vitro, reproducible y sencillo de manejar, que incluye bacterias representativas de la placa dental, entre ellas las principales bacterias periodontopatógenas, en un medio ambiente físico-químico similar a las condiciones ambientales de la cavidad oral. El modelo permitirá estudiar, mediante la puesta a punto de técnicas metodológicas basadas en biología molecular, la dinámica de la comunidad microbiana que alberga, los determinantes ecológicos que marcan pautas en su formación y desarrollo, o su posible susceptibilidad o resistencia a agentes antibacterianos.