Caracterización de la proteína efectora Stec de "Salmonella" en el modelo eucariótico de levadura

Resumen

Numerosos factores de virulencia de Salmonella son proteínas efectoras secretadas por sistemas de secreción tipo III (T3SS) al interior de la célula hospedadora, que favorecen la entrada de la bacteria en el interior de la misma y su replicación y su pervivencia intracelular. Para ello, actúan sobre distintos procesos y estructuras celulares (tales como las rutas de transducción de señales mediadas por MAP quinasas y el citoesqueleto) que están altamente conservados en todos los organismos eucari óticos. Este hecho permite utilizar la levadura Saccharomyces cerevisiae como modelo de célula hospedadora para el estudio de dichas proteínas efectoras. En este trabajo hemos caracterizado la función de la proteína efectora SteC de Salmonella. Typh imurium utilizando este modelo. La sobreexpresión de SteC en levadura es capaz de inhibir su crecimiento alterando sustancialmente su morfología y estructuras del citoesqueleto. Además, SteC produce la inhibición de la ruta de apareamiento mediada po r las MAP quinasas Fus3 y Kss1 y de la ruta de alta osmolaridad mediada por la MAP quinasa Hog1. Hemos demostrado que dicha inhibición tiene lugar a nivel de la Rho GTPasa Cdc42 mediante la interacción con su GEF Cdc24, a través de la región amino-te rminal de SteC. Esta región presenta similitud estructural a proteínas reguladoras de la señalización por proteínas G (RGS), y de hecho también interacciona con la subunidad ? de la proteína G heterotrimérica de la ruta de apareamiento (Gpa1). Esta r egión amino-terminal de SteC es asimismo responsable de los efectos fenotípicos y de inhibición del crecimiento observados al sobreexpresar de SteC en levadura, así como de su localización membranal. Por consiguiente, utilizando el modelo de levadura , hemos caracterizado una nueva región funcional en la proteína SteC, estableciendo un punto de partida para nuevos estudios de esta proteína en células eucarióticas superiores.