Las ciclodextrinas como modificaciones de las fases móviles en las separaciones por HPLC de los alcaloides derivados de beta-carbolinaaplicaciones analíticas y de impacto ambiental

Resumen

Se ha estudiado la influencia de la presencia de distintas ciclodextrinas (CDs): beta-CD, 2-hidroxipropil-beta-CD, 2,3-dimetil-beta-CD y 2,3,6-trimetil-beta-CD, adicionadas a las fases móviles sobre las condiciones de la separación de alcaloides derivados de beta-carbolina: norharmano, harmano y harmina. Estos compuestos poseen una gran significación biológica, ya que, además de la diferente actividad farmacológica que presentan, aparecen de forma endógena en el organismo humano como consecuencia de la ingestión de alcohol y determinados alimentos. Las CDs adicionadas convenientemente a las fases móviles mejoran las separaciones cromatográficas de compuestos química y estructuralmente muy relacionados (isómeros). En este trajo de investigación se emplearon dos fases estacionarias de sílice modificada, C1 (metilo) y como referencia C18 (octadecilo). Como fases móviles se optimizó la proporción disolvente orgánico/tampón acuoso paralas mezclas metanol/tampón, etanol/tampón y n-propanol/tampón. Se estudió la influencia de la temperatura en el proceso de separación. Así mismo, se determinaron por HPLC las constantes de asociación de los complejos alcaloide-CD, en las diferentes condiciones experimentales descritas para todos los alcoloides y las distintas CDs estudiadas. Además, se caracterizaron los complejos de inclusión sintetizados y aislados por técnicas espectroscópicas de resonancia magnética nuclear y de luminiscencia. Los resultados obtenidos demuestran que la presencia de CDs afecta muy significativamente a las separaciones, ya que permite obtener eficacias de separación similares a las que se obtienen mediante el empleo de fases móviles sin CDs pero con una proporción más elevada de solvente orgánico en la fase móvil. La presencia de CDs permite reducir la proporción de disolvente orgánico en la fase móvil; lo que se denomina fases móviles limpias, por su contenido mayoritario en agua. Se ha determinado