Caracterización de las funciones de movilización del plásmido pmv158
- GUZMAN MALUENDA, LEDA
- Manuel Espinosa Padrón Director
Defence university: Universidad Complutense de Madrid
Year of defence: 1997
- Julian Perera Chair
- Antonio Tormo Garrido Secretary
- Jose Luis Garcia Lopez Committee member
- Fernando de la Cruz Committee member
- Ramón Díaz Oreja Committee member
Type: Thesis
Abstract
El plasmido estreptococico no conjugativo pmv158 (5.536 kb) ha sido eficientemente movilizado por otros plasmidos autotransferibles como pip501 y pambeta1. El plasmido pmv158 contiene un gen mobm cuyo producto genico (mobm) esta involucrado en su movilización a un nuevo huésped. El producto del gen mobm fue clonado en un vector de expresión y la proteina mobm fue sobreexpresada y purificada. Esta proteína presento tener actividad de corte especifico de sitio y hebra sobre adn superenrollado de pmv158 y fue capaz de convertirlo en formas circulares abiertas. Se determinaron una serie de parámetros necesarios para su actividad nucleofilica como: presencia de mg2+, temperatura y tiempo de reacción. Además mostro unirse específicamente al extremo 5' de la hebra cortada, sugiriendo que podría conducir la hebra-t a la célula recipiente.