Receptores de glutamato receptivos akainatocaracterización funcional

Resumen

Mediante técnicas electrofisiológicas, en neuronas de hipocampo en cultivo, hemos demostrado la existencia funcional de receptores de kainato en el SNC. En un 27% de las células registradas, la aplicación rápica de kainato provocó una corriente entrante que se desensibilizó rápico y casi totalmente. Otros agonistas como quiscualato y glutamato activaron el receptor de kainato generando una respuesta similar. Aproximadamente el 80% de las neuronas registradas expresaron receptores de kainato independientemente de los dias en cultivo. Esto coincidió con el porcentaje de células inmunoreactivas para el anticuerpo monoclonal contra la subunidades GluR5/6/7. Electrofisiológicamente, se encontraron 3 tipos de células: neuronas en las que sólo apareció una corriente entrante desensibilizante en respuesta a kainato; células en las que el kainato indujo una respuesta más lenta y no desensibilizante y un Análisis por RT-PCR de material aislado de neuronas únicas, tras su registro electrofisiológico, puso de manifiesto que las células que presentaron respuestas desensibilizantes a kainato expresaban ARNm de la subunidad GluR6. En un 20% de las células también se encontró expresión de GluR5. No se detectó expresión de las subunidades GluR7, KA1 y KA2. EN el sitio Q/R predominó la variante no editada Q, aunque se observó que en una misma célula pueden coexistir la versión editada y la no editada. Las propiedades funcionales del canal en los receptores de kainato nativos se correlacionaron con el grado de edición del sitio Q/R de la subunidad GluR6. Dos nuevos antagonistas no competitivos de los receptores de AMPA (GYKY 53655 y GRKY 52466) no afectaron a los receptores de kainato nativos, pero bloquearon completamente la corrientes a través de los receptores de AMPA. Por tanto, podemos concluir que las células de hipocampo en cultivo expresan receptores funcionales de kainato, formados por la