Efecto del sistema cannabinoide endógeno sobre la función de barrera intestinal

Resumen

Introducción:La respuesta inflamatoria intestinal desencadenada por el estrés psicológico puede estar mediada por la inducción de disfunción en la barrera intestinal. Los dos tipos de receptores cannabinoides (CB) descritos y clonados, CB1 y CB2, se expresan y actúan de forma diferente en el intestino humano. Sin embargo, el papel del sistema endocannabinoide (SEC), y en particular de CB1, en la función de barrera intestinal es todavía muy poco conocido. Hipótesis y objetivos:Nuestra hipótesis es que CB1 modula la función de barrera intestinal en ratones expuestos a estrés acústico y por inmovilización (EAI).Para demostrarla nos planteamos los siguientes objetivos: Valorar el efecto de la exposición a EAI sobre la expresión intestinal de CB1 y las enzimas de síntesis y degradación del SEC intestinal Estudiar el papel del CB1 en la permeabilidad epitelial paracelular cólica y la translocación bacteriana tras exposición a EAI Determinar el papel del CB1 en la expresión de enzimas proinflamatorias en el colon tras exposición a EAI Evaluar el efecto del CB1 sobre la secreción cólica de IgA tras la exposición a EAI Valorar el efecto del EAI sobre los niveles plasmáticos de corticosterona en ratones wild type (WT) y con ausencia de expresión de CB1 mediada genéticamente (CB1-/-) y su influencia en la permeabilidad epitelial Material y métodos:Para alcanzar nuestros objetivos empleamos un modelo de ratón CB1-/- y una aproximación farmacológica con un antagonista de CB1 (rimonabant), siendo los animales expuestos a un modelo de EAI. Se evaluó la expresión proteica de las formas inducibles de NOS2 y COX2 y de IgA, la permeabilidad a 51Cr-EDTA y la translocación bacteriana a los ganglios linfáticos mesentéricos, el hígado y el bazo.Para descartar la influencia del aumento de los niveles de corticosterona en los efectos observados en los ratones CB1-/-, se inyectó en un grupo de ratones CB1-/- un bloqueante de la síntesis de glucocorticoides (GC) antes de cada sesión de EAI. Resultados:El EAI no produjo cambios en la expresión de CB1 pero sí incrementó la expresión de enzimas de degradación del SEC sin producir cambios en las enzimas de síntesis de dicho sistema. El EAI indujo una mayor expresión de las enzimas proinflamatorias NOS2 y COX2 en la mucosa cólica de los ratones CB1-/- y los tratados con el rimonabant en comparación con los controles WT. Estos cambios se relacionaron con un mayor grado de disfunción de la barrera epitelial cólica en los ratones CB1-/- medida mediante 1) una menor secreción de IgA, 2) un aumento de la permeabilidad paracelular a 51 Cr-EDTA, y 3) una mayor translocación bacteriana tanto en condiciones basales como tras exposición a EAI. El antagonismo farmacológico con rimonabant reprodujo el aumento de las enzimas proinflamatorias en el colon inducido por el estrés descrito en los ratones CB1-/-. El bloqueo de la síntesis de corticosterona no influyó en la permeabilidad intestinal observada en los ratones CB1-/-. Conclusiones:Nuestras principales conclusiones son: 1.- El EAI no aumenta la expresión de CB1 pero sí produce un incremento de la expresión de las enzimas de degradación del SEC intestinal sin alterar la expresión de las enzimas de síntesis de dicho sistema. 2.- Los ratones CB1-/- muestran un incremento de la permeabilidad epitelial paracelular cólica y de la translocación bacteriana tras exposición al estrés que no está mediado por ocludina ni por NOGO-B. 3.- La ausencia de señalización vía CB1 a través de un modelo genético y farmacológico produce un aumento de la expresión de enzimas proinflamatorias en el colon tras exposición al EAI. 4.- El bloqueo genético y farmacológico del CB1 disminuye la producción cólica de IgA no mediado por CCL28. 5.- La inhibición farmacológica de la síntesis de GC no afectó a la permeabilidad cólica en ratones estresados CB1-/-, lo que sugiere que el aumento de la misma observado se debe a otros factores distintos de la elevación de los niveles de corticosterona.