Desarrollo y estandarización de un banco de sangre de cordón umbilical
- Bornstein Sanchez, Rafael
- Florinda Gilsanz Rodríguez Director
Defence university: Universidad Complutense de Madrid
Fecha de defensa: 16 May 2000
- Eduardo Díaz-Rubio García Chair
- Rafael Enríquez de Salamanca Lorente Secretary
- Miguel Ángel Sanz Alonso Committee member
- Carmen Calés Bourdet Committee member
- Alvaro Urbano Ispizua Committee member
Type: Thesis
Abstract
El objetivo principal de este estudio ha sido la evaluación y estandarización de protocolos para la creación de un Banco de Sangre de Cordón Umbilical(SCU), habiendo sido desglosado en dos objetivos parciales: la caracterización de la SCU mediante estudio experimental de las propiedades hematopoyéticas e inmunológicas de la misma, y la puesta a punto del procesamiento de SCU para su validación como unidades trasplantables. Se ha realizado un análisis fenotípico y de clonogenicidad de células hematopoyéticas, así como un estudio fenotípico y funcional de poblaciones linfocitarias de SCU, comparándose con muestras control de médula ósea(MO) y sangre periférica de adultos(SPA). Respecto al segundo objetivo del trabajo, se ha hecho un estudio comparativo de diferentes protocolos de obtención, fracionamiento y congelación con el fin de preservar la máxima celularidad y viabilidad en las unidades procesadas. Asimismo, para su validación definitiva, se han definido criterios normalizados que incluyen la tipificación del complejo HLA con técnicas de alta resolución y la detección de posibles enfermedades transmisibles que garantice la seguridad en los eventuales receptores de trasplante. Las conclusiones globales de este estudio son:1) la proporción de células progenitoras hematopoyéticas es superior en SCU que en MO y SPA movilizada, lo que sugiere un mayor potencial de repoblación hematopoyética;2) los linfocitos de SCU muestran una relativa inmadurez fenotípica y funcional que permite predecir un menor potencial de enfermedad injerto contra huesped asociado a la SCU;3) la combinación de venopunción y perfusión de la placenta enriquece significativamente la celularidad de las unidades; 4) la SCU conservada a 4º C más de 12 horas sufre una reducción importante en la clonogenicidad y viabilidad celular;5) se ha optimizado la estandarización de métodos de procesamiento basada en el empleo de hidroxietil almidón para el fraccionamiento, bolsas de congelación de 24 ml. Inmersión en nitrógeno líquido y solución de albúmina/dextrano en la descongelación de las unidades, con los que se consigue preservar casi la totalidad de su potencial hematopoyético; 6) los criterios aplicados en la validación garantizan su idoneidad y una óptima selección de parejas donante/receptor. Como consecuencia de este estudio,se ha establecido un Banco de SCU en el Hospital 12 de Octubre de Madrid con la inclusión, hasta el momento, de 139 unidades validadas y potencialmente elegibles, en el contexto del REDMO, para su utilización como fuente de células progenitoras hematopoyéticas para trasplante.