Biología molecular del bacteriófago Cp1 de "Streptococcus pneumoniae"

Resumo

Se ha determinado la secuencia completa del genoma del fago cp-1 de streptococcus pneumoniae, que contiene 19.345 pb. El análisis de la secuencia revela la existencia de 29 fases de lectura abierta (orfs), 23 de las cuales se localizan en la cadena superior y las seis restantes en la inferior. La comparación de las secuencias de las proteinas codificadas por las orfs con las existentes en el banco de datos mostro que diez de ellas presentan una alta similitud con proteinas del fago 29 de bacillus subtilis. Además, se ha elaborado el mapa de transcripcion del genoma de cp-1, distinguiéndose unos mrnas tempranos en los extremos del genoma y otros tardíos en la región central. Existen 15 regiones promotoras, cuatro de ellas en tandem y una que da lugar a un pequeño rna que interviene en el empaquetamiento del dna en las precabezas. Por otra parte, se han clonado y expresado en escherichia coli 13 orfs y de algunas de ellas se ha determinado el n-terminal de la proteína que codifican. Se ha demostrado que la proteína de la cabeza del fago se procesa para formar el virion infectivo por medio de una proteasa codificada por el propio fago. Asimismo, se han clonado y expresado en e. Coli y neumococo los genes que codifican proteinas implicadas en los procesos de lisis, observándose que cuando se expresan conjuntamente el gen de la holina y de la enzima litica se produce la perdida de viabilidad del cultivo y la lisis celular, mientras que la expresion únicamente del gen de la holina conduce a la perdida de viabilidad sib lisis del cultivo. Por ultimo, se ha determinado que el inicio de la replicacion tiene lugar en el tercer nucleotido del genoma y que las dos primeras bases de recuperan mediante un mecanismo peculiar denominado "sliding-back"