Aplicación de los anticuerpos monoclonales para la detección de enterotoxinas estafilococicas

Abstract

Se produjeron en este estudio un total de 22 anticuerpos monoclonales frente a enterotoxinas estafilococicas (ees). De ellos, 14 fueron obtenidos frente a eeb, mientras que los 8 restantes lo fueron frente a eea. Estos anticuerpos fueron caracterizados, determinándose su titulo y curvas de dilución, capacidad de detección de ee homologa en elisa indirecto, estudios de inhibición con determinación de la constante de disociación y posibles reacciones con otros serotipos de ees y subclase de inmunoglobulina a la que pertenecían. Se comprobó la validez de estos anticuerpos monoclonales para su aplicación en un sistema de detección elisa tipo das, comprobándose que no todos realizaban adecuadamente las funciones de tapizado o conjugado, seleccionándose aquellas parejas que lo hacían de forma correcta. Una de estas parejas (la formada por los anticuerpos monoclonales a5 en función de tapizado y a7 como conjugado) permite la determinación en una sola prueba de la presencia o ausencia de ees, tanto en substrato laboratoriales, como en alimentos, detectando las enterotoxinas en cantidades bajas (0,6 ng/ml) entre otras sustancias presentes en los extractos alimenticios analizados