Mapa génico del plásmido de virulencia de Salmonella enteritides y caracterización de regiones homólogas del cromosoma de Salmonella typhi

Résumé

Se ha procedido a la obtención del mapa génico del plásmido de virulencia de Salmonella enteritidis mediante la secuenciación parcial de subciones procedentes de la genoteca plasmídica hindill. Las secuencias obtenidas fueron enviadas a bancos de secuencias internacionales con el fin de detectar secuencias homólogas. De esta forma se han podido situar sobre el plásmido en estudio todos los genes anteriormente descritos en los distintos plásmidos de virulencia de diferentes serotipos de Salmonella; así como, detectar un nuevo orf no descrito hasta el momento cuya secuencia deducida de aminoácidos mostró homología con la endonucleasa nuc del plásmido pkm101. Se ha localizado y caracterizado la región tra del plásmido, la de máxima divergencia frente al plásmido de virulencia de Salmonella typhimurium, encontrándose incompleta con respecto a la del plásmido f. Se ha llevado a cabo la detección, localización y clonación de la región homóloga al plásmido de virulencia presente en el cromosoma de Salmonella typhi. Tras la secuenciación parcial de las regiones cromosómicas homólogas se determinó la presencia de secuencias correspondientes a pefl, orf7, orf8 y orf9 descritas en el plásmido de S. typhimurium. debido a que el producto deducido del orf8 presenta identidad con proteínas tipo dsba se realizo la secuenciación en doble cadena tanto del orf cromosómico de S. typhi como del plasmídico de S. enteritidis homólogos al orf8, denominándose dlt y dle respectivamente. Las secuencias de aminoácidos deducidas de las nucleotídicas obtenidas mostraron características propias de proteínas tipo dsba, pudiendo por tanto presentar esa misma actividad en Salmonella