Análisis genético y bioquímico de la molécula MR1 (MHC related 1)

Résumé

Las moléculas MHC de clase I clásicas desempeñan funciones muy importantes en el contexto de la filosofía del sistema inmune: presentación antigénica y regulación de la actividad NK. Existe un grupo de moléculas homólogas a las MHC-I clásicas que desempeñan funciones dentro y fuera del contexto de la acción inmune, en general estas moléculas se denominan moléculas MHC de clase I no clásicas. MR1 es una molécula MHC de clase I no clásica con un elevado grado de homología a las moléculas MHC de clase I clásicas y cuya función no ha sido determinada. El objetivo del trabajo presentado en esta tesis es intentar descifrar cual es la función de MR1 mediante un análisis genético de MR1 en primates y la generación de sueros frente a la región extracelular de la molécula MR1. El conjunto de todos los datos aportados y discutidos en esta tesis nos permiten decir de MR1 y de su posible función lo siguiente. MR1 es un gen no polimórfico en humanos, al menos en la región codificada por los exones 2 y 3 (dominios alfa1 y y alfa2). MR1 había sido descrito en humano, rata y ratón, ahora también ha sido descrito en chimpancé común y orangután. En todas las especies en que se ha descrito, MR1 se expresa generando por splicing alternativo isoformas transcripcionales, cuya finalidad biológica se desconoce. Algunas de estas isoformas transcripcionales, como las aquí descritas, carecen del dominios alfa3 o simplemente son un péptido de 83 aminoácidos formados por el péptido líder y parte del dominio alfa1. En el genoma del hombre y del chimpancé común se ha detectado una secuencia (MR1P1) con alta homología al gen MR1 cuya función no se conoce. MR1P1 es un fragmento génico homólogo a la región comprendida entre el intrón 2 y el intrón 3 del gen MR1, por tanto contiene secuencias homólogas a los exones codificantes para los dominios alfa1 y alfa2 de MR1. El alineamiento de las proteínas de MR1 descritas hasta la fecha indican que MR1 se encuentra muy conservada evolutivamente, particularmente en los dominios alfa1 y alfa2, parece ser que pudiera asociarse a beta2m (en ratón ya ha sido demostrada dicha asociación) pero que no parece claro que interaccinase con CD8 ni uniera péptido similares a los presentados por las moléculas MHC de clase I clásicas. Las moléculas de MR1 de roedores y primates presentan ciertas diferencias en las secuencias de la región homóloga al sitio de unión al péptido y en la región citoplasmática que podrían implicar diferencias entre ambos grupos de especies en lo que se refiere al ligando unido y a la transmisión de la señal al interior celular. La generación de sueros frente a la región extracelular de la molécula MR1 y de líneas celulares transfectadas con el cdna de MR1 ha permitido detectar por primera vez la molécula MR1 humana. La molécula MR1 humana tiene un tamaños de 42 kda, está glicosilada y tiene una baja expresión basal al menos en la línea de estudio