Reprogramación del polen y obtención de plantas doble-haploide de Capsisum annuum L.Marcadores celulares y expresión de moléculas señalizadoras de estrés.

Résumé

El polen es capaz de cambiar su proceso de desarrollo, reprogramarse y entrar en una nueva ruta denominada embriogénica, tras un tratamiento de estrés. Tras su reprogramación, la microspora comienza a dividirse simétricamente dando lugar a proembriones y embriones que posteriormente continúan su desarrollo Regenerando plantas haploides o doble-haploides. En este contexto, el cultivo de anteras es, hoy en día, uno de los métodos más eficientes para la obtención de plantas doble-haploides, de gran utilidad para generar nuevas líneas isogénicas y variedades, así como para Estudios genéticos y de mutagénesis. El pimiento (capsicum annuum l.) Es uno de los cultivos hortícolas más importantes desde el punto de vista Económico en españa, siendo éste el país con mayor producción de la unión europea. En esta tesis doctoral, un primer objetivo ha sido la obtención plantas doble-haploides a partir de cultivos de Anteras de capsicum annuum yolo Wonder var. B. Hemos optimizado los protocolos existentes (Mitykó et al.,1995), estudiando diversos factores tales como la correlación entre la morfología de los botones florales, el tamaño y la coloración de las anteras con antocianina y el estadio de desarrollo de las microsporas, así como diversos aspectos del cultivo in vitro y el tratamiento de estrés inductor de la embriogénesis. Por otro lado, se ha llevado a cabo la caracterización celular de las primeras etapas de desarrollo hasta el estado de torpedo en la embriogénesis de microsporas de Capsicum annuum L. Se ha determinado el nivel de ploidía de las plantas procedentes del cultivo de microsporas, mediante citometría de flujo. Un segundo objetivo ha sido el análisis de distintos aspectos del proceso de reprogramación del polen a embriogénesis, concretamente la identificación de marcadores en etapas clave y la expresión de proteínas de estrés y señalizadoras.