Transmisión natural por pulgones de potyvirus ensayos de interferencia aplicados al control de virosis

Resumen

Este trabajo aborda el estudio de varios aspectos del mecanismo de transmisión de potyvirus por pulgones con especial atención a la búsqueda de posibles sistemas de interferir con el mismo. Se analizó la causa para la pérdida de transmisión por pulgones de una serie de variantes del potyvirus TEV con modificaciones puntuales en la región codificante de la proteína HC-Pro. Para ello se utilizaron varias técnicas para el estudio de interacción de proteínas, detectándose una modificación puntual en la región codificante de la proteína de la cápsida de este virus que podria ser la causante de la pérdida de función en esta colección de mutantes. Asímismo se ha obervado que la capacidad de interacción de los distintos factores HC-Pro consigo mismos no varía para las distintas variantes, a pesar de las diferencias en su secuencia. En la búsqueda de herramientas para interferir con la transmisión de potyvirus por pulgones se ha empleado el virus de la Sharka, PPV. Se ha desarrollado un sistema de expresión transitoria de la proteína HC-Pro de PPV basado en "Agrobacterium tumefaciens" que permite expresar la proteína fuera del contexto de de la infección viral. La proteína HC-Pro expresada mediante este sistema es completamente activa en trasnmisión. Se ha empleado este sistema para producir proteína HC-Pro de PPV no funcional en transmisión y se ha ensayado la capacidad de la misma para interferir en el proceso sin observar una reducción significativa de los valores de transmisión en ninguno de los experimentos realizados. Asímismo se ha probado a interferir la transmisión de virus activo mediante infecciones mixtas con variantes virales no transmisibles por pulgón sin obtener de nuevo una reducción significativa de la tasa de transmisión