Sistemas alternativos de conservación, intercambio y recuperación de líneas transgénicas murinas basados en técnicas de biotecnología reproductiva

Resumen

El ratón es el modelo animal más ampliamente utilizado en investigación, con multitud de aplicaciones en las diferentes áreas de la ciencia. Sin embargo, hay un factor limitante, la disponibilidad de espacio en los animalarios que impide poder alojar todas las líneas que serían deseables, obligando a eliminar algunas de las instalaciones o retrasando la creación o recepción de otras nuevas por falta literal de espacio. Esta situación es muy común en el caso de laboratorios donde se generan modelos murinos transgénicos. Dado el elevado número de líneas que puede llegar a darse mediante este procedimiento es siempre aconsejable la utilización de técnicas que garanticen su conservación mediante sistemas de archivo basados en la criopreservación. Complementariamente al problema de la conservación, otro problema logístico importante es el intercambio de líneas entre los laboratorios. El intercambio de animales vivos es siempre un riesgo sanitario para la colonia receptora, lo que hace que muchos estabularios sólo acepten la entrada de embriones. El uso de embriones congelados para el intercambio implica una tecnología que no está al alcance de todos los centros y cuyo coste, considerable, puede evitarse. El objetivo de esta Tesis fue doble, en primer lugar profundizar en los problemas de viabilidad de espermatozoides congelados de la estirpe de ratón que se utiliza de forma mayoritaria para los modelos en biomedicina, C57Bl/6, tratando de explorar alternativas técnicas que permitieran mejorar su eficiencia y que hagan de la criopresevación espermática una alternativa real para el archivo de líneas mutantes de ratón. En segundo lugar se planteó el simplificar la técnica de intercambio de estirpes entre instituciones basada en el uso de embriones buscando alternativas a la congelación para el transporte de embriones