Aspectos moleculares de la enfermedad de McArdle

Resumen

INTRODUCCIÓN: La enfermedad de McArdle (Glucogenosis tipo V) es un miopatía metabólica de herencia autosómica recesiva que se produce por un defecto en el gen PYGM (11q13), que codifica para la isoforma muscular de la glucógeno fosforilasa (GPM), en zima que inicia la degradación del glucógeno muscular con liberación de glucosa-1-fosfato. Los pacientes presentan típicamente intolerancia al ejercicio, mialgias y contracturas. Aproximadamente la mitad de los pacientes presentan mioglobinuria. OBJ ETIVOS: (1) Genotipar una serie clínica de 42 pacientes con déficit de glucógeno fosforilasa muscular. (2) Estudiar el mecanismo patogénico de 6 nuevas mutaciones identificadas y la utilidad del ARNm-PYGM en este tipo de estudios. (3) Demostrar la e xistencia de amplificación ¿ilegítima¿ de los transcritos del gen PYGM en sangre periférica y su posible aplicación al diagnóstico molecular. (4) Estudiar la relación de la expresión proteica de GPM en homogenados musculares de pacientes con la enfer medad de McArdle. (5) Analizar las interacciones de GPM con glucógeno sintasa (GS) y SERCA1, proteínas reguladoras del metabolismo muscular, en tejido músculo-esquelético de sujetos control y en pacientes con enfermedad de McArdle. RESULTADOS: En est e trabajo se han caracterizado molecularmente a 42 pacientes con la enfermedad de McArdle, siendo la mutación p.R50X la más frecuente de la serie (52 frecuencia alélica). Se identificaron 6 nuevas mutaciones: c.529-8G>A, c.(1969 214)_(2177 369)del, c.645G>A, c.2310_2311dupCC, c.407delG y c.1325T>A. Se ha confirmado la presencia del ARNm del gen PYGM mediante amplificación ¿ilegítima¿ del ADNc de este gen obtenido a partir de sangre periférica total. No se ha logrado identificar la banda de 97 K Da correspondiente al peso molecular de la isoforma muscular de la GPM, mediante la técnica de western blot en homogenados musculares correspondientes a 17 pacientes caracterizados tanto genética como bioquímicamente. Esta ausencia parece ser debida a la degradación de la GPM alterada inmediatamente tras ser sintetizada. Esta ausencia total de proteína altera cualitativamente a la glucógeno sintasa muscular (GS) y la SERCA1, ambas proteínas implicadas en el metabolismo del músculo esquelético du rante el ejercicio. CONCLUSIONES: Las siguientes conclusiones confirman y aportan consistencia a hallazgos previamente descritos de epidemiología molecular y relación genotipo-fenotipo en la enfermedad de McArdle: i) La mutación p.R50X es la más fre