Efecto funcional del bloqueo selectivo de TGF-beta en el modelo murino de artritis inducida por colágeno

  1. Gonzalo Gil, Elena
Supervised by:
  1. María Galindo Izquierdo Director

Defence university: Universidad Complutense de Madrid

Fecha de defensa: 10 December 2012

Committee:
  1. Yasmina Juarranz Chair
  2. José Antonio Solis Herrero Secretary
  3. Javier Dotor de las Herrerías Committee member
  4. Juan de Dios Cañete Crespillo Committee member
  5. Olga Sánchez Pernaute Committee member
Department:
  1. Medicina

Type: Thesis

Abstract

Efecto funcional del bloqueo selectivo de TGF-beta en el modelo murino de artritis inducida por colágeno TGF-? es una proteína homodimérica implicada en el control de múltiples procesos biológicos, tales como desarrollo embrionario, inmunomodulación , proliferación, diferenciación, angiogénesis, migración y apoptosis celular. Los efectos dependientes de TGF?? descritos in vitro con células de la sinovial reumatoide son muy dispares. TGF-? es secretado por casi todos los componentes celulares de la sinovial reumatoide y, aparte de ejercer acciones sobre las células de estirpe mesenquimal, ejerce un efecto modulador sobre las células inflamatorias comportándose como agente anti o proinflamatorio según las condiciones del entorno. En los raton es, TGF?? es un elemento esencial en la diferenciación tanto de las células Th17 como Treg en presencia o ausencia de IL?6, respectivamente. El efecto de inhibir selectivamente TGF?? sobre la diferenciación y funcionalidad de las células T en el mode lo murino de artritis inducida por colágeno (CIA) se desconoce y podría tener tanto efectos pro como antinflamatorios, particularmente si la inhibición se realiza en la fase de inducción de la artritis o cuando ésta ya esté establecida. NAFB002 o p17 es un péptido inhibidor de TGF??1 probado con éxito en modelos animales de daño hepático y fibrosis pulmonar. Los objetivos del trabajo fueron: 1.- Analizar la señalización de TGF-? en el tejido sinovial reumatoide y estudiar la fosforilación de pro teínas Smad en respuesta a la estimulación con TGF-? en fibroblastos sinoviales reumatoides. 2.- Analizar el efecto clínico de bloquear selectivamente TGF-? sobre el desarrollo clínico de la artritis inducida por CII y su gravedad durante la fase de inducción de la artritis y una vez establecida la enfermedad. 3.- Evaluar histológicamente el efecto del tratamiento sobre el grado de inflamación y destrucción ósea y cartilaginosa en ratones con CIA. 4.- Analizar el efecto de inhibir TGF-? sobre la diferenciación y funcionalidad de las diferentes poblaciones de células T (Th1, Th17, Th2 y Treg), en el modelo de CIA. Para analizar la señalización de TGF-? en la sinovial reumatoide, se recogieron muestras de tejido sinovial de pacientes con artr itis reumatoide, artrosis e individuos sanos y se incluyeron en parafina para los análisis por inmunohistoquímica. Asimismo, se recogieron muestras para obtener cultivos de fibroblastos sinoviales y analizar la señalización de proteínas Smad inducida