Modulación de los canales Kv4.3 cardiacos humanos por endoncannabinoides y ácidos grasos

Abstract

El sistema endocannabinoide es un sistema modulador que actúa sobre el sistema nervioso, el inmune y el endocrino, aunque sus efectos también pueden extenderse al sistema cardiovascular. Los endocannabinoides (EC) pueden ser sintetizados en el corazó n, sin embargo no se dispone de datos acerca de la posible modulación que pueden ejercer sobre canales iónicos y la actividad eléctrica cardiaca. Los EC son producidos ¿a demanda¿, estando su síntesis estimulada en situaciones de daño tisular. Por lo tanto, parece razonable asumir que, en el miocardio, la síntesis de estos compuestos aumentará en situaciones patológicas como la fibrilación auricular (FA), en la que se produce inflamación, estrés oxidativo, fibrosis intersticial y apoptosis. Adem ás, la síntesis de EC en tejido nervioso, aumenta a altas frecuencias de estimulación y al aumentar la [Ca2 ]i, condiciones ambas que también están asociadas a la FA. En la presente Tesis Doctoral se han estudiado los efectos de los EC [anandamida (A EA), 2-araquidonoilglicerol (2-AG) y lisofosfatidilinositol (LPI)], de análogos de EC [(palmitoiletanolamida (PEA), oleoiletanolamida, estearoiletanolamida), así como de los ácidos grasos de los cuales proceden estos compuestos (ácido araquidónico, p almítico, oléico y esteárico) sobre los canales cardiacos clonados humanos Kv4.3 KChIP2, que generan la corriente transitoria de salida de K (Ito1). Las corrientes se registraron mediante la técnica del patch-clamp en células CHO que expresaban de f orma estable los canales Kv4.3 KChIP2 o bien los receptores cannabinoides CB1 o GPR55. Los resultados demuestran que tanto la AEA como el 2-AG, bloquean de forma independiente de receptor los canales cardiacos Kv4.3 KChIP2. Sin embargo, los compuesto s PEA y LPI son menos potentes para bloquear estos canales. El bloqueo que producen los EC es consecuencia de su interacción directa con la parte externa de la subunidad alfa- Kv4.3 que forma el poro del canal, descartando posibles uniones a diferent es proteínas auxiliares o los efectos derivados de perturbaciones en la membrana celular. Los resultados se confirmaron en miocitos auriculares procedentes de pacientes sometidos a cirugía cardíaca. En muestras auriculares de estos pacientes se compr obó la presencia de receptores CB1, CB2 y GPR55 cuya expresión aumenta en pacientes con FA. Los resultados indican también que la estimulación de receptores CB1, pero no la de GPR55, inhibe la Ito1 como consecuencia de la fosforilación del canal medi