Estudio de biomarcadores predictivos de respuesta a la terapia anti receptor del factor de crecimiento epidérmico (anti-EGFR) en el cáncer colorrectal metastásico

Resum

El cancer colorectal (CCR) es la tercera causa de cáncer en el mundo, con un millón de casos nuevos anuales. Aproximadamente la mitad de los pacientes desarrolla metástasis durante su enfermedad. La supervivencia de estos pacientes, con cáncer colorrectal metastásico (CCRm), ha mejorado recientemente gracias a la aparición de los anticuerpos monoclonales anti-EGFR (cetuximab y panitumumab). El beneficio de estos fármacos está restringido a aquellos pacientes con tumores con estado nativo de KRAS (Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog) ya que se ha demostrado que los pacientes con estado mutado de KRAS no responden al tratamiento. Por tanto, antes de tratar al paciente con un anti-EGFR, es condición necesaria saber el estado de KRAS. El 40 % de estos pacientes presenta mutación somática tumoral en el exón 2 del gen KRAS, estando localizada el codón 12 ó 13. A pesar de estos resultados no todos los pacientes KRAS nativos presentan respuesta o incremento en la supervivencia tras recibir tratamiento anti-EGFR, siendo la respuesta en torno del 60%. El objetivo fue estudiar otros biomarcadores de la vía EGFR para seleccionar mejor a los pacientes con CCRm candidatos de recibir esta terapia. Materiales y métodos: Se trata de un estudio retrospectivo de 107 pacientes tratados en primera línea con un anti-EGFR y con estado nativo de KRAS en los codones 12/13. Se extrajo ADN y ARN a partir de muestras de tejido tumoral de los pacientes. El estudio de la mutación V600E de BRAF (V-raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1) fue hecho por discriminación alélica usando sondas TaqMan. Con el kit ¿PIK3CA Mutation Test Kit¿ (Qiagen) se estudiaron por PCR a tiempo real las mutaciones E542K, E545K/D en el exón 9 y la H1047R del exon 20 de PIK3CA (Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha isoform). Para los ensayos de expresión de anfirregulina (AREG) y epirregulina (EREG) se utilizaron ensayos Taqman on demand (Life Technologies Inc) por PCR a tiempo real. La cuantificación relativa de la expresión génica fue hecha siguiendo el método de comparación de Ct y utilizando como gen endógeno el PSMB4 (proteasome, prosome macropain, subunit, beta type, 4) así como un pool de 10 muestras de tejido normal de individuos sanos. El punto de corte de expresión fue determinado por tertiles. Los biomarcadores se correlacionaron con los parámetros clínicos de eficacia: respuesta clínica (RR), supervivencia libre de progresión (SLP) y supervivencia global (SG). La respuesta clínica fue evaluada siguiendo los criterios RECIST (Response Evaluation Criteria in Solid Tumors). Las curvas de SLP y la SG fueron estimadas por la técnica de Kaplan-Meier. La asociación entre los biomarcadores y la SLP y la SG fue realizada usando modelos de regresión proporcional Hazard-Ratio. La asociación entre los biomarcadores con la respuesta fue hecha con los test ¿2 (Pearson) o bien el exacto de Fisher. Resultados: Con una mediana de seguimiento de 15,8 meses se obtuvieron medianas de SLP y de SG de 8,4 meses y 20,3 meses respectivamente. La mutación de BRAF presentó una prevalencia de 7,69 % mientras que la de PI3KCA fue de 10%. El análisis del estado mutacional de BRAF con la respuesta no resultó significativo (p=0,059) mientras que con la SLP (p=0,008) y la SG (0,0073) sí que lo fue, confirmándose su valor de mal pronóstico. El análisis del estado mutacional de PI3KCA no presentó diferencias significativas. De los ligandos estudiados, solo la expresión de AREG resultó ser estadísticamente significativa con la respuesta (p=0,0027) y con la SLP (p=0,0158) presentando los pacientes con alta expresión medianas de SLP de 10,5 meses. Conclusión: En cuanto a la utilización de AREG como biomarcador predictivo este trabajo es generador de hipótesis para futuros trabajos realizados con un número mayor de pacientes.