Caracterización molecular y epidemiológica de aislamientos clínicos de "Pseudomonas aeruginosa" multirresistente

Resumen

La creciente amenaza de resistencia antimicrobiana en P. aeruginosa viene dada por la extraordinaria capacidad de este microorganismo para desarrollar resistencia a casi todos los antimicrobianos disponibles bien por selección de mutaciones en su cromosoma, bien por adquisición de otros determinantes de resistencia a través de la transferencia horizontal de elementos genéticos que codifican para carbapenemasas, principalmente carbapenemasas de clase B (metalo-beta-lactamasas MBLs). Dada la importancia nosocomial de este microorganismo, así como la emergencia de MBL en estos últimos años nos planteamos como objetivo de esta tesis determinar la prevalencia de aislamientos de P. aeruginosa multirresistente durante un periodo de 4 años (2007-2010) en el Hospital Universitario 12 de Octubre, así como el estudio de la epidemiología molecular de estos aislamientos y el posible papel de las carbapenemasas como mecanismo responsable de esta multirresistencia. Durante los 4 años de estudio, 183 pacientes que fueron infectados y o colonizados por Pseudomonas spp. multirresistente. La prevalencia se incrementó durante este periodo desde un 2.8 por ciento a un 15.3 por ciento. El estudio de la epidemiología molecular de los aislamientos multirresistentes de P. aeruginosa reveló que el incremento en la prevalencia de P. aeruginosa multirresistente se debió fundamentalmente a la emergencia de dos clones, clon A (ST235) y clon B (ST175). La cepa epidémica A fue responsable de un brote intrahospitalario en pacientes del servicio de hematología y causó una elevada mortalidad. Los mecanismos de resistencia incluían mutaciones en los genes GyrA y ParC, inactivación de la porina oprD, así como, la presencia de 7 determinantes de resistencia en un integrón de codificación cromosómica (In647) que albergaba diferentes enzimas modificadoras de aminoglucósidos (EMA), así como una duplicación en tándem de blaGES-1 y blaGES-5. Los aislamientos de P. aeruginosa multirresistentes perteneciente al clon B ST175 afectaron a 104 pacientes para llegar a convertirse en una cepa endémica en nuestra institución. El clon B fue portador de una MBL tipo VIM-2 en 103 aislamientos. Esta MBL se encontraba en un integron de clase 1 de codificación cromosómica junto con la EMA aac6Ib. La presencia de MBL tipo VIM-2 también fue detectada en otros 5 clones de P. aeruginosa y en 6 clones de P. putida. El análisis del entorno genético de las MBL reveló una gran variabilidad, mostrando diferentes combinaciones de MBL y EMA. El integrón In41 se detectó en los aislamientos pertenecientes al clon B, y también en aislamientos pertenecientes a otros clones. Este estudio reveló además la presencia de cinco nuevos tipos de integrones denominados In896, In902, In903, In908 e In927. Todos ellos presentaron estructuras Tn402-like con el extremo 3 CS completo pero con el módulo tni truncado.