Relevancia de la ruta de la anemia de Fanconi en la inestabilidad genética de las células de leucema mieloide crónica

Abstract

La leucemia mieloide crónica (LMC) es una enfermedad neoplásica de la célula madre hematopoyética que se caracteriza por la expresión del oncogén de fusión BCR- ABL1 y una progresiva inestabilidad genética que alcanza su máximo durante la crisis blástica. La ruta de la Anemia de Fanconi/susceptibilidad al cancér de mama (AF/BRCA) coordina varios mecanismos de reparación del ADN y está implicada directamente en el control de la estabilidad genética de las células. El objetivo principal de este trabajo ha sido el de investigar el papel de la ruta AF/BRCA en la inestabilidad genética de células de LMC. Nuestros resultados han mostrado por primera vez que en células de pacientes con LMC se produce una deficiencia en la formación de focos de reparación de FANCD2, proteína central de la ruta AF/BRCA. La expresión ectópica de BCR-ABL1 en las células CD34+ cromosómicas y paralelamente, resistencia celular frente a agentes entrecruzantes del ADN. La expresión ectópica del supresor de tumores BRCA1 restauró la formación de focos de reparación de FANCD2 y redujo la aparición de cromosomas y centrosomas aberrantes en los progenitores hematopoyéticos BCR-ABL1, poniendo de manifiesto que la disminución de la expresión de BRCA1 en LMC es responsable de la inestabilidad genética de estas células. Puesto que los microARNs (miARNs) son reguladores post-transcripcionales clave en las células, estudiamos su posible contribución en la represión de BRCA1 en LMC. En este sentido, los resultados demostraron que BCR-ABL1 controla los niveles de BRCA1 a través de una ruta alternativa que implica un aumento en la expresión del grupo miR-183-96-182, tanto en progenitores de LMC como en células CD34+ transducidas con un vector que expresa BCR-ABL1. La represión de los distintos componentes de este grupo de miARNs mediante ARNs de interferencia expresados con vectores lentivirales, no sólo incrementó los niveles de BRCA1 en células en proliferación, sino que también aumentó la expresión de dos de los supresores más importantes de la ruta PI3K/AKT, como son FOXO3a y PTEN. Este aumento correlacionó con la disminución de los niveles de radicales superóxido y de la fragilidad cromosómica espontánea en los progenitores BCR-ABL1. En conjunto, estos resultados indican que el oncogén de fusión BCR-ABL1, a través de la desregulación del grupo miR-183-96-182, induce inestabilidad genética en los progenitores BCR- ABL1. indujo la aparición de centrosomas supernumerarios y aberraciones De forma sorprendente, la sobre-expresión del grupo miR-183 produjo una reducción drástica en la proliferación y en la capacidad clonogénica de los progenitores hematopoyéticos BCR-ABL1. Este efecto se debió a un marcado aumento en la senescencia celular. El estudio de la senescencia reveló que ésta se disparaba de forma prematura por un mecanismo que recapitula muchas de las características de la senescencia inducida por pérdida de PTEN (PICS). A nuestro parecer ésta es la primera vez que se caracteriza una respuesta PICS en progenitores hematopoyéticos. Estos resultados sugieren por tanto, que la regulación fina del grupo de miR-183 no sólo está participando en la acumulación de especies reactivas de oxígeno y la respuesta al daño en el ADN, particularmente a través de la ruta de la AF/BRCA, sino que su modulación podría tener también un papel en el control de la senescencia celular, incluso a nivel de las células madre leucémicas, por lo que proponemos este grupo de miRNAs como nuevas dianas para la terapia anti-LMC.