Implicación de AMPK en la señalización intracelular inducida por CCR7 en las células dendríticas

Resumen

Las células dendríticas son células presentadoras de antígenos profesionales capaces de activar a los linfocitos T vírgenes e iniciar la respuesta inmune adaptativa. En su fase final de diferenciación, denominada fase de CD maduras (CDms), estos leucocitos pueden migrar a través de los vasos linfáticos aferentes hasta los ganglios linfáticos, donde presentan los antígenos capturados en las áreas de inflamación a los linfocitos T. Las CDms maduras expresan el receptor de quimioquinas CCR7 que es fundamental para que estas células se dirijan a los ganglios linfáticos. En trabajos previos se mostró que la activación de CCR7 aumenta la supervivencia de las CDms, aunque los mecanismos de señalización que regulan este proceso no se conocen por completo. AMPK (AMP-dependent Kinase) es una molécula considerada un “guardián energético” celular debido a que es capaz de detectar cambios en la proporción AMP/ATP. En respuesta a un aumento de los niveles de AMP, AMPK activa las rutas de señalización catabólicas e inhibe las anabólicas. En esta tesis se estudia la posible implicación de AMPK en la regulación de la supervivencia de las CDs mediada por CCR7. En primer lugar, analizamos si AMPK tiene un papel inductor de la supervivencia o de la apoptosis en las CDs. La reducción de los niveles de AMPK con un siRNA provoca un aumento de la supervivencia de las CDms, lo que indica que AMPK induce muerte en las CDs. Se sugiere que la activación de AMPK provoca una muerte de tipo apoptótico porque morfológicamente implica procesos de picnosis y de fragmentación del núcleo y bioquímicamente depende de caspasas, implicando específicamente a la caspasa-3. Los experimentos en los que se analizó la supervivencia de las células en los ganglios linfáticos mostraron que AMPK induce apoptosis de las CDs in vivo. Además, los resultados obtenidos indican que AMPK induce la apoptosis de las CDs mediante al menos dos mecanismos. Primero, la activación de AMPK induce la translocación del factor de transcripción FOXO1 del citoplasma al núcleo. Una vez en el núcleo, FOXO1 activa la transcripción de la proteína pro-apoptótica Bim, miembro de la familia Bcl2. Segundo, la activación de AMPK inhibe la actividad del complejo pro-supervivencia mTORC1 en las CDs...