Ligandos multidiana, una estrategia alternativa para el tratamiento de la enfermedad de alzheimer

Resumo

Esta tesis doctoral titulada LIGANDOS MULTIDIANA, UNA ESTRATEGIA ALTERNATIVA PARA EL TRATAMIENTO DE LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER se enmarca en la investigación de terapias eficaces para luchar contra la enfermedad de Alzheimer EA. La EA es una de las enfermedades con mayor repercusión en los países desarrollados. Esta enfermedad tiene un impacto dramático debido a que los fármacos disponibles proporcionan un tratamiento sintomático temporal pero no detienen la progresión de la enfermedad. Desde la aprobación de la memantina en 2003 no se ha aprobado ningún otro fármaco y todos los fármacos que se han evaluado en ensayos clínicos durante los últimos años han fracasado. Debido a la complejidad de la enfermedad, el descubrimiento de fármacos multidiana parece ser una buena opción para encontrar un tratamiento nuevo y eficaz para esta enfermedad. El objetivo fundamental del trabajo es desarrollar una nueva familia de derivados carbonílicos de indazol capaz de actuar simultáneamente en dos o tres dianas terapéuticas involucradas en la EA, como son el receptor CB2 y las enzimas BACE1 y BuChE. La selección de esta serie de compuestos se ha basado en distintos estudios computacionales realizados que muestran una alta probabilidad de interacción con el receptor CB2 y las enzimas BuChE y BACE1. Para ello, se han considerado tres posiciones del esqueleto de indazol susceptibles de ser modificadas. Una vez definido el esqueleto de la familia de derivados, así como la naturaleza de los posibles sustituyentes mediante técnicas computacionales, se ha preparado sintéticamente un conjunto representativo de derivados carbonílicos de indazol para proceder a su evaluación farmacológica que ha consistido en un ensayo de inhibición enzimática de las enzimas AChE y BuChE, un ensayo de competencia enzimática, un ensayo de inhibición enzimática de BACE1 y un estudio del efecto cannabinoide en tejido deferente de ratón. De los resultados obtenidos en los ensayos descritos, se pudo concluir que se han desarrollado compuestos muy interesantes con acción en tres dianas y con las combinaciones de dos de las tres dianas, entre los que cabe destacar el NP145 inhibidor de las enzimas BuChE y BACE1, el NP152 agonista CB2 e inhibidor de la enzima BuChE, el NP137 agonista CB2 e inhibidor de la enzima BACE1 y el NP148 agonista CB2 e inhibidor de las enzimas BuChE y BACE1. Una vez conocidos los compuestos más relevantes, se han utilizado las técnicas de docking para conocer la orientación y conformación que los ligandos adoptan en la cavidad de cada uno de los tres receptores. Los resultados obtenidos en estos estudios han demostrado que esta técnica es capaz de predecir de manera virtual la capacidad de interacción de los ligandos con los receptores objetivo. Finalmente, se han seleccionado dos compuestos para posteriores estudios farmacológicos, un derivado que actúa en dos dianas, el NP137, y un compuesto que actúa en las tres dianas, el NP148. Por un lado, se ha estudiado la viabilidad celular de los dos compuestos mediante la evaluación de la eficacia de los mismos en la actividad proliferativa de linfocitos inmortalizados de pacientes de la EA, y mediante la valoración del efecto neuroprotector de los compuestos en cultivos de neuronas corticales de rata tratados con el péptido beta amiloide. Los resultados demuestran que ambos derivados revierten la respuesta anómala de los linfoblastos de pacientes de EA, además de la muerte celular inducida por el péptido beta amiloide. Y por otro lado, se ha evaluado el efecto de estos dos compuestos en un modelo in vivo de la EA. Para determinar las alteraciones cognitivas de este modelo, se ha llevado a cabo el ensayo del laberinto de Morris. Como resultado más relevante, hay que destacar que el derivado NP137 es capaz de mejorar la capacidad cognitiva, en un modelo animal de la enfermedad de Alzheimer y, por tanto, es un prometedor candidato como fármaco multidiana para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.