Silenciamiento presináptico por el receptor cb1 de cannabinoides

Resumen

Los receptores de cannabinoides de tipo CB1 son los receptores presinápticos acoplados a proteínas G que inhiben la liberación de neurotransmisor en las sinapsis del SNC tanto a corto como a largo plazo. Trabajos de este laboratorio han mostrado que la activación del receptor CB1 con HU210 induce el silenciamiento presináptico. Las sinapsis silentes son incapaces de liberar neurotransmisor tras la llegada de un potencial de acción pese a experimentar una entrada de calcio normal y contar con todas las proteínas de la maquinaria exocitótica. El objetivo de este estudio ha sido estudiar los mecanismos moleculares del silenciamiento en neuronas granulares de cerebelo mediante técnicas de imagen en célula viva. Observamos que el silenciamiento es un fenómeno reversible y puede ser inducido mediante endocannabinoides, sugiriendo la posible relevancia fisiológica del proceso. Resultados previos del laboratorio habían mostrado que el silenciamiento implica a la proteína Epac, una diana de AMPc alternativa a PKA. Mediante el uso de siARN de la isoforma 2 y la inhibición farmacológica de la misma demostramos la implicación de esta isoforma concreta en el silenciamiento presináptico inducido por los cannabinoides. Además, observamos que la actividad de PLC parece estar implicada en la vía de señalización activada por el receptor CB1 para silenciar los botones sinápticos. El silenciamiento presináptico parece estar relacionado con un bajo contenido en la proteína presináptica RIM1alpha y a un alto contenido en receptor CB1. Las células que carecen de RIM 1¿ tienen más botones silentes en condiciones basales que las células control y el silenciamiento aumenta significativamente tras el tratamiento con HU210. Además, los botones silentes como consecuencia de la carencia RIM1alpha son insensibles a la activación de la proteína Epac, sugiriendo que esta proteína se sitúa en alguna etapa anterior de las proteínas RIM en la cascada de señalización.