Estudio a corto y largo plazo de la melatonina y el 5-MCA-NAT como tratamiento en la hipertensión ocular y el glaucoma

Resum

El glaucoma engloba una serie de patologías caracterizadas por la pérdida de células ganglionares en la retina y daño en el nervio óptico que desemboca finalmente en una ceguera total. El aumento en la presión intraocular PIO aparece como uno de los principales desencadenantes de esta patología al producir la disminución del flujo sanguíneo y el aumento de especies oxidantes en estos tejidos. La aproximación terapéutica más común es el uso de fármacos hipotensores, a menudo combinados, y asociados frecuentemente a efectos no deseados. En este marco, la melatonina y sus derivados, debido a su activo papel como hipotensores y su capacidad como antioxidantes, emergen como una alternativa viable al uso de los fármacos tradicionales. La secreción del ión cloruro Cl- ha sido identificado como el factor limitante en la formación del humor acuoso y la regulación de la PIO, hemos medido la acción de nuestros compuestos sobre este parámetro. Nuestros resultados demuestran que ambas substancias son capaces de disminuir de forma aguda la secreción de Cl- de forma dosis ependiente, por lo que este mecanismo puede ser el responsable de los efectos hipotensores mostrados por ambas substancias. Además, esta acción no es contrarrestada por antagonistas selectivos de los receptores MT1 y MT2; sino que éstos, aumentan la acción de nuestros compuestos. Estos datos podrían señalar la implicación del receptor putativo MT3, acoplado a un sistema de transducción que funciona en sentido inverso a estos receptores. En este sentido nuestros resultados muestran que el receptor implicado es sensible a prazosín, antagonista selectivo del receptor MT3, y acoplado al aumento de las concentraciones intracelulares de AMPc.Además de los efectos hipotensores agudos, el 5-MCA-NAT proyecta su acción más allá de las 96 horas. Este efecto a largo plazo podría indicar la acción de nuestros compuestos como reguladores génicos. Mediante qPCR hemos constatado que tanto la melatonina como el 5-MCA-NAT son capaces de reducir la transcripción de las anhidrasas carbónicas CAII y CAXII, enzimas que regulan indirectamente la secreción de Cl-; sin embargo únicamente el 5-MCA-NAT consigue una reducción de CA XII más allá de las 72 horas. Esta disminución a nivel de mensajero se traduce en una disminución de los niveles de enzima, en modelo in vitro e in vivo. Esta regulación está asociada a un aumento de la acción hipotensora del Trusop, fármaco comúnmente utilizado en el glaucoma, en conejos pretratados con una única dosis de nuestros compuestos.En este mismo sentido nuestras substancias promueven un aumento en los niveles de ARN mensajero de los adrenoreceptores alfa (ADRA2A) y una disminución en el caso de los adrenoreceptores beta (ADRB2), implicados en la regulación de la dinámica del humor acuoso, en modelo in vitro. Estos cambios se traducen a nivel de proteína en este mismo modelo. Por el contrario, in vivo sólo los ADRA2A muestran cambios significativos, y únicamente en el caso del pretratamiento con el 5-MCA-NAT. Refrendando estos datos la potenciación del efecto hipotensor del timolol (betabloqueante antiglaucomatoso) es muy inferior al obtenido por la brimonidina agonista de los ADRA2ANuestros resultados indican que la acción hipotensora a corto plazo de la melatonina y el 5-MCA-NAT se debe a una disminución aguda en la secreción de Cl- de las células del ENP. Esta acción es mediada por un receptor sensible al prazosín (clásicamente denominado MT3 y acoplada a un aumento intracelular de AMPc.Ambos compuestos presentan además una acción a largo plazo debida, al menos en parte, en la regulación génica de ADRA2A, ADRB2 y de CA II y CA XII. Esta acción se traduce en fenómenos de potenciación de otros fármacos antihipertensivos durante periodos superiores a 96 horas. Esta capacidad potenciadora junto con su capacidad hipotensora y antioxidante convierten a estas moléculas en potenciales fármacos para el tratamiento de la hipertentión ocular y el glaucoma