Prevención de la anafilaxia con antígenos del anisakis simplex en un modelo animal

  1. MARCO MARTIN, GUADALUPE
Supervised by:
  1. José Manuel Zubeldia Ortuño Director
  2. Pedro Antonio Reche Gallardo Director
  3. María Luisa Baeza Ochoa de Ocáriz Director

Defence university: Universidad Complutense de Madrid

Fecha de defensa: 11 February 2016

Committee:
  1. Rafael Enríquez de Salamanca Lorente Chair
  2. Julio Contreras Rodríguez Secretary
  3. Joaquín Sastre Merlín Committee member
  4. Rodolfo Álvarez Sala Walther Committee member
  5. Tomás Chivato Pérez Committee member
Department:
  1. Medicina

Type: Thesis

Teseo: 140009 DIALNET

Abstract

Objetivos: Desarrollar un modelo murino de anafilaxia sistémica inducida por cacahuete y analizar el efecto inhibidor que ejercen los antígenos del Anisakis simplex (antígeno somático y excreción/secreción) sobre la anafilaxia. Materiales y métodos: Se desarrolló un modelo de anafilaxia sistémica por cacahuete. Se compararon dos cepas de ratón (C3H/HeOuJ y BALB/c), con la determinación de IgG1, IgG2a, e IgE específicas, provocación intraperitoneal (i.p.) con cacahuete, liberación de histamina y estímulo específico de los esplenocitos. Se optimizó la dosis de cacahuete mas propicia entre 50, 100, 250 microgramos. Se produjeron extractos somático y excreción/secreción del Anisakis simplex y se estudió el efecto del tratamiento con dosis diarias de ambos extractos, durante el periodo de sensibilización, en la inducción de anafilaxia Resultados: Se demostró sensibilización y anafilaxia al cacahuete en ambas cepas. Los C3H/HeOuJ, produjeron mayor nivel de inmunoglobulinas específicas, desarrollaron síntomas más intensos, y liberaron más histamina tras la provocación, por lo que se seleccionaron para el estudio. Se eligió para la sensibilización 3 dosis de cacahuete de 100 microgramos. El tratamiento i.p. con ambos extractos de Anisakis simplex, redujo los niveles de IgG1 e IgE específicas y el extracto de excreción/secreción incrementó los niveles de IgG2a específica. El tratamiento con extracto somático aminoró los síntomas de la anafilaxia, y el extracto de excreción/secreción los inhibió por completo. Este extracto disminuyó la liberación de IL-5, e incrementó la IL-10 e IFN-¿ por los esplenocitos estimulados. Conclusiones: Ambas cepas de ratón son idóneas para el estudio de la anafilaxia sistémica, siendo la cepa C3H/HeOuJ más adecuada para la evaluación de la respuesta clínica. Los antígenos parasitarios del Anisakis simplex (fundamentalmente los de excreción/secreción) son capaces de reducir la respuesta anafiláctica y ejercer un efecto inmunomodulador a nivel humoral y celular.