Prevención de la anafilaxia con antígenos del anisakis simplex en un modelo animal
- MARCO MARTIN, GUADALUPE
- José Manuel Zubeldia Ortuño Director
- Pedro Antonio Reche Gallardo Director
- María Luisa Baeza Ochoa de Ocáriz Director
Defence university: Universidad Complutense de Madrid
Fecha de defensa: 11 February 2016
- Rafael Enríquez de Salamanca Lorente Chair
- Julio Contreras Rodríguez Secretary
- Joaquín Sastre Merlín Committee member
- Rodolfo Álvarez Sala Walther Committee member
- Tomás Chivato Pérez Committee member
Type: Thesis
Abstract
Objetivos: Desarrollar un modelo murino de anafilaxia sistémica inducida por cacahuete y analizar el efecto inhibidor que ejercen los antígenos del Anisakis simplex (antígeno somático y excreción/secreción) sobre la anafilaxia. Materiales y métodos: Se desarrolló un modelo de anafilaxia sistémica por cacahuete. Se compararon dos cepas de ratón (C3H/HeOuJ y BALB/c), con la determinación de IgG1, IgG2a, e IgE específicas, provocación intraperitoneal (i.p.) con cacahuete, liberación de histamina y estímulo específico de los esplenocitos. Se optimizó la dosis de cacahuete mas propicia entre 50, 100, 250 microgramos. Se produjeron extractos somático y excreción/secreción del Anisakis simplex y se estudió el efecto del tratamiento con dosis diarias de ambos extractos, durante el periodo de sensibilización, en la inducción de anafilaxia Resultados: Se demostró sensibilización y anafilaxia al cacahuete en ambas cepas. Los C3H/HeOuJ, produjeron mayor nivel de inmunoglobulinas específicas, desarrollaron síntomas más intensos, y liberaron más histamina tras la provocación, por lo que se seleccionaron para el estudio. Se eligió para la sensibilización 3 dosis de cacahuete de 100 microgramos. El tratamiento i.p. con ambos extractos de Anisakis simplex, redujo los niveles de IgG1 e IgE específicas y el extracto de excreción/secreción incrementó los niveles de IgG2a específica. El tratamiento con extracto somático aminoró los síntomas de la anafilaxia, y el extracto de excreción/secreción los inhibió por completo. Este extracto disminuyó la liberación de IL-5, e incrementó la IL-10 e IFN-¿ por los esplenocitos estimulados. Conclusiones: Ambas cepas de ratón son idóneas para el estudio de la anafilaxia sistémica, siendo la cepa C3H/HeOuJ más adecuada para la evaluación de la respuesta clínica. Los antígenos parasitarios del Anisakis simplex (fundamentalmente los de excreción/secreción) son capaces de reducir la respuesta anafiláctica y ejercer un efecto inmunomodulador a nivel humoral y celular.