"KIR2DL5contribución a la diversidad del complejo de genes ""KIR"", expresión diferencial de sus alelos y distribución de potenciales ligandos"

Resumen

La actividad funcional de las células NK está regulada por el balance de receptores KIR (Killer-cell Ig-like Receptors) activadores e inhibidores y sus ligandos (moléculas MHC-I en la célula diana). El complejo KIR en el humano, en la región cromosómica 19q13.4, está compuesto por 15 genes y 2 pseudogenes organizados en haplotipos que exhiben una extensa variación en el número y tipo de genes KIR que contienen. Además, el polimorfismo alélico y haplotipos KIR atípicos contribuyen a la variabilidad global del complejo KIR. En este trabajo, hemos realizado el primer análisis detallado en población española sobre la distribución de genotipos y haplotipos KIR, donde los haplotipos atípicos contribuyen de forma considerable a la diversidad. KIR2DL5 es el KIR más recientemente descrito en humanos. Su papel en la inmunidad no se comprende bien porque todavía no se ha identificado su ligando. Está representado en el genoma por dos genes, el telomérico KIR2DL5A y el centromérico KIR2DL5B. Mientras que el ARNm de la mayoría de alelos KIR2DL5B es indetectable, KIR2DL5A es transcrito normalmente. Sin embargo, de los alelos más comunes, KIR2DL5A001 y KIR2DL5A005, que difieren en dos sustituciones de aminoácido en el dominio D2 (N152D y G174S), la expresión en superficie determinada mediante citometría de flujo con el único anticuerpo monoclonal disponible, UP-R1, sólo ha sido demostrada para el primero. En este trabajo hemos analizado los perfiles de expresión y el reconocimiento por UP-R1 de KIR2DL5A005. Nuestros resultados demuestran que UP-R1 reconoce a KIR2DL5A005 peor que a KIR2DL5A001 y que KIR2DL5A005 es retenido mayoritariamente en el interior celular debido a la sustitución de glicina por serina en la posición 174 de su dominio D2, la cuál es también la principal responsable de su peor reconocimiento por UP-R1. Además, hemos diseñado un sistema celular reportero BWZ.36 KIR-CD3¿ que ha demostrado ser efectivo para estudiar la distribución de ligandos potenciales de KIR. En concreto, KIR2DL5 parece reconocer una molécula no MHC expresada mayoritariamente en células de origen no hematopoyético y posiblemente conservado en primates.