Nuevos desarrollos metodológicos en SPME

Resumen

La Microextracción en fase sólida (SPME) ha experimentado un rápido desarrollo desde su introducción hace más de 20 años teniendo un gran impacto sobre las prácticas de muestreo y preparación de muestra en áreas como análisis químico, bioanálisis, los alimentos y las ciencias ambientales. Sin embargo, en otras áreas como análisis clínico, ciencias farmacéuticas y médicas, se espera un crecimiento en sus aplicaciones. El objetivo fundamental de la presente investigación ha sido la implementación de nuevas metodologías mediante la técnica de SPME. En el primer estudio, se modifica la interfase comercial SPME-HPLC, la cual fue adaptada para realizar una extracción dinámica en línea de los analitos de la muestra sobre la fibra con desorción mediante aplicación de vibración en la interfase durante ambos pasos de extracción y desorción. Para la optimización, se eligieron como compuestos prueba hidrocarburos aromáticos polinucleares (PAHs), en concreto catorce, los cuales fueron detectados por fluorescencia. Se analizaron muestras de agua del Pantano San Juan y del río Guadalix. La interfase fue validada por comparación de los resultados con los obtenidos mediante el método de referencia 550.1 de la EPA. La extracción dinámica mostró buena sensibilidad respecto al método de referencia, no existiendo diferencias significativas entre ambos métodos al nivel de probabilidad del 95por ciento. En la segunda parte de la tesis, se desarrolla una interfase SPME/HPLC Off-Line, en la cual el proceso de desorción de los analitos en la fibra se lleva a cabo térmicamente lo cual evita el contacto de la fibra con los disolventes orgánicos de la fase móvil; recolectándolos después de la desorción en una mezcla de disolventes orgánicos para posteriormente ser inyectados en el cromatógrafo de HPLC con detector de fluorescencia. Entre las ventajas que posee esta nueva interfase off-line es que se protege la fibra de posibles daños por contacto, que ocurren al utilizar la interfase comercial on-line para HPLC. Para la optimización de la interfase se eligieron como compuestos ¿tests¿ para cinco PAHs. Se analizaron muestras de agua del Pantano de Valdemayor y del río Guadalix. La interfase fue validada comparando los resultados con los obtenidos mediante el método de referencia 550.1 de la EPA, no existiendo diferencias significativas al nivel de probabilidad del 95por ciento. La tercera parte de tesis aborda la problemática de los vertidos ilegales en las fuentes hídricas; se diseñó un dispositivo de muestreo para la microextracción en línea que consta de una caja de acero recubierta con malla de acero y en el interior un soporte con cuatro fibras; dicho dispositivo se sumerge en aguas de rios durante un tiempo de tres días, lo que le permite realizar un muestreo dinámico e identificar posibles vertidos industriales en los afluentes. En este estudio se analizaron aguas de los ríos Manzanares y Jarama, permitiendo la detección e identificación de muy diversos compuestos volatiles en aguas de dichos rios. Por último, se evalúa el interés potencial de un marcador en muestras de orina de madres gestantes utilizando la técnica de HS-SPME-GC-MS; este marcador permitió determinar el sexo del feto en el primer trimestre de con un 94 por ciento de acierto en una muestra de 36 mujeres gestantes. La consolidación de este marcador requiere realizar un estudio más completo, analizando un número de muestras de orina más representativo a nivel estadístico.