Evaluación de la existencia de un fenotipo linfopénico en la Enfermedad de Crohndiferencias basales, inmunológicas y evolutivas

Resumen

En la práctica clínica habitual se ha detectado que existe una subpoblación de pacientes con Enfermedad de Crohn (EC) que en el momento del diagnóstico y sin interacción con fármacos o enfermedades virales o autoinmunes presentan tendencia a la linfopenia primaria. No se ha estudiado hasta el momento la posibilidad de unas características clínicas diferentes o unas inmunológicas propias en esta subpoblación con tendencia a la linfopenia (ECTL). De apreciarse estas especificidades, podríamos planteat la existencia de un fenotipo linfopénico de la EC. Se ha valorado en diferentes estudios el papel que tienen los diferentes linfocitos reguladores en la patogenia la EC y se ha apreciado que existen diferencias entre los pacientes con EC y el resto de la población general tanto en lo referente a la cuantía en sangre periférica, como en mucosa afectada por la enfermedad. De la misma forma, la activación de estas células reguladoras, que tienen el papel de frenar la inflamación al ser activadas, también ha sido valorada en los pacientes con EC. Se desconoce a día de hoy si en estos pacientes ECTL existe alguna característica diferencial respecto a la cantidad o actividad de los diferentes subtipos linfocitarios. La evaluación de estos posibles rasgos distintivos podría explicar desde el punto de vista inmunológico la existencia del referido fenotipo con tendencia a la linfopenia. Esta tesis se compone por lo tanto de dos protocolos que buscan estudiar las diferencias entre los pacientes con ECTL y los pacientes con EC no asociada a linfopenia (ECNL). En un primer protocolo se busca analizar mediante un estudio de cohortes las diferencias entre una cohorte ECTL (establecida por unos estrictos criterios de selección) y otra de pacientes ECNL respecto a las características basales y a la evolución clínica durante un periodo de seguimiento de seis años. En un segundo estudio se trata de evaluar mediante citometría de flujo multiparamétrica las diferencias cuantitativas entre subpoblaciones linfocitarias reguladoras y la diferente activación que presentan estas células, medida como expresión de perforina intracelular entre un grupo de pacientes con ECTL, otro con ECNL y un último grupo de controles sanos. OBJETIVOS El objetivo global de esta tesis es analizar desde un punto de vista clínico (tanto basal como evolutivo) e inmunológico las diferencias entre los pacientes con ECTL y el resto de pacientes con EC. De confirmarse estas diferencias, se podría demostrar la existencia de un fenotipo linfopénico en la EC con características propias que permitiera eventualmente prever diferencias en el curso clínico o diseñar en estos pacientes ECTL nuevas terapias en el futuro basadas en su patogenia inmunológica. METODOLOGÍA En el primer protocolo se ha desarrollado un estudio retrospectivo de cohortes en el que se evaluaron las características basales y variables clínicas evolutivas de una cohorte de pacientes con ECTL y otra con ECNL de forma retrospectiva durante 6 años. En el segundo protocolo, se seleccionó una muestra de pacientes con ECTL, otra con ECNL y una última con controles sanos pareados por edad y sexo. Fueron sometidos los pacientes a una citometría de flujo multiparamétrica para evaluar las diferencias entre las distintas subpoblaciones linfocitarias reguladoras de ambos grupos y su activación medida por la expresión intracelular de perforina. CONCLUSIONES Con los datos obtenidos en ambos protocolos podemos concluir que existe un fenotipo con tendencia a la linfopenia que engloba el 20% aproximadamente de pacientes con EC, que presenta un diagnóstico en edades mayores, con mayor desarrollo de mielotoxicidad al usar inmunomoduladores (IMM) y con mayor tasa de cirugías resectivas. Este grupo ECTL presenta una mayor proporción de células reguladoras en sangre periférica durante la remisión clínica, pero con una activación celular menor que en los pacientes ECNL.