Tráfico a través del aparato de Golgi y extensión apical en Aspergillus nidulans

Zusammenfassung

La ruta secretora es un proceso celular por el que determinadas proteínas maduran postraduccionalmente y son enviadas a los endosomas, al exterior celular o distribuidas en la membrana plasmática. Aspergillus nidulans es un hongo filamentoso que crece exclusivamente por extensión apical gracias a la fusión con el ápice de sus hifas de vesículas de secreción, lo que aporta las membranas requeridas para el crecimiento celular y las enzimas necesarias para la síntesis de pared. El modo de crecimiento polarizado de sus células le confiere una gran dependencia de la ruta secretora. En esta tesis se ha establecido, mediante el bloqueo condicional del tráfico desde el retículo endoplasmático, que el aparato de Golgi es un orgánulo dinámico y transitorio que depende de tráfico desde el retículo endoplasmático. Los resultados obtenidos subrayan las diferencias entre el Golgi temprano y el transGolgi, TGN. Sin embargo, también se ha demostrado que los factores intercambiadores de GTP GeaA del Golgi temprano y HypB del TGN son, hasta cierto punto, intercambiables, puesto que una sustitución en GeaA permite el crecimiento del hongo en ausencia de HypB. Por otro lado, la caracterización básica de las GTPasas de la familia ArfSar y de sus proteínas reguladoras demuestra el alto grado de conservación de estos interruptores moleculares. En la última parte de esta tesis investigamos el tráfico de tres proteínas diferentes, que son ChsB, una proteína integral de membrana, InuA, una enzima soluble y EglC, una proteína anclada a GPI, para tratar de responder a la pregunta de si existen diferentes rutas de exocitosis para proteínas con diferente estructura y función fisiológica. La localización de ChsB en la membrana apical se mantiene por un reciclaje endocítico indirecto que implica su transporte desde un compartimento endosomal independiente de RabB al TGN en un proceso mediado por dineína, RabC y GARP. EglC, por su parte, realiza una ruta que depende del transporte al aparato de Golgi de dicha enzima recién sintetizada en el retículo y de su exocitosis, hipotéticamente basolateral, en vesículas RabE. Por último, InuA realiza una ruta de secreción indirecta que está supeditada a la integridad de los endosomas tempranos, lo que sugiere que transita por éstos antes de secretarse. Estos resultados sugieren que en A. nidulans podrían existir diferentes rutas de tráfico intracelular que permitiesen la coordinación entre la obtención de nutrientes del medio extracelular, el crecimiento por extensión apical y la síntesis de pared celular.