Modulacion del sistema endocannabinoide como herramienta terapéutica en esclerosis múltipleefecto sobre los condroitin sulfato proteoglicanos

Resumen

La esclerosis múltiple (EM) es una enfermedad inflamatoria desmielinizante y neurodegenerativa que afecta al sistema nervioso central. La EM se caracteriza por presentar áreas multifocales de inflamación, desmielinización y daño axonal en la sustancia blanca del SNC que da lugar a la formación de lesiones donde se observan cicatrices glióticas crónicas con proliferación astrocítica. En la EM junto con los procesos de desmielinización, tienen lugar procesos de reparación y remielinización, sin embargo, conforme la enfermedad progresa la remielinización resulta menos eficiente. Este fallo en la remielinización parece ser debido a problemas en la diferenciación de los progenitores de oligodendrocitos (OPCs). Se ha apuntado a la presencia de factores inhibitorios en las zonas desmielinizadas como los responsables de impedir la diferenciación de los OPCs entre los que se encuentran los condroitín sulfato proteoglicanos (CSPGs). El modelo del virus de Theiler resulta adecuado para analizar aspectos de la formación de la cicatriz glial en lesiones inflamatorias y desmielinizantes. Los cannabinoides han demostrado aliviar algunos aspectos de la sintomatología de la EM, presentan propiedades antioxidantes, antiexcitotóxicas, neuroprotectoras y mejoran la remielinización, promoviendo la diferenciación de los OPCs, sin embargo, poco se sabe sobre sus efectos sobre los CSPGs. El objetivo global de la Tesis Doctoral es investigar la implicación de los CSPGs en el fallo de remielinización que tiene lugar en las fases crónicas del modelo de TMEV-IDD, así como el papel del endocannabinoide 2-AG en su regulación y modulación. Los objetivos específicos incluyen: i) Análisis de la expresión de los CSPGs en la fase crónica del modelo de TMEV. ii) Estudio de la influencia de los CSPGs en los déficits neurológicos en el modelo de TMEV-IDD, haciendo uso de compuestos que impiden la acumulación de dichas macromoléculas. iii) Análisis del potencial terapéutico del inhibidor reversible de la enzima MAGL, UCM03025 y del 2-AG en los modelos de EAE y TMEV-IDD, estudiando su capacidad para modular la respuesta inflamatoria y la acumulación de CSPGs. iv) Investigar la síntesis y de CSPGs, en cultivos de astrocitos, así como su modulación por 2-AG e inhibidores de la MAGL estableciendo los receptores y las vías de señalización implicadas. Los resultados obtenidos indican que: i) Hay astrogliosis y acumulación de CSPGs asociada a lesiones desmielinizadas en la médula espinal del TMEV-IDD. ii) El tratamiento con inhibidores de la síntesis de CSPGs reduce la expresión de CSPGs y mejoran los déficits motores asociados a la patología. iii) El UCM03025 mejora la sintomatología en los modelos de EAE y TMEV-IDD. En el modelo de TMEV, reduce la acumulación de CSPGs y la inflamación aumentando el número de oligodendrocitos, detectándose una menor pérdida axonal y una mayor remielinización. iv) El 2-AG e inhibidores de la MAGL reducen la expresión de CSPGs en astrocitos estimulados con TGF-ß1. La disminución del Neurocán por 2-AG está mediado por el receptor CB2 y las vías implicadas incluyen la ruta de TGF-ß/SMAD, y la de PI3K-Akt-mTOR. Los resultados nos permiten concluir que: i) La mejora observada en la sintomatología en los animales TMEV tras la administración de inhibidores de la síntesis de CSPGs, evidencia su relevancia en el desarrollo de la patología. ii) Los efectos terapéuticos ejercidos por el UCM03025 tanto en el modelo de EAE como en el modelo de TMEV-IDD muestran la importancia de aumentar el tono endocannabinoide del 2-AG como mecanismo para disminuir la inflamación y promover los mecanismos endógenos de reparación. iii) El mecanismo mediante el cual el 2-AG podría estar mediando sus efectos beneficiosos in vivo incluiría su acción disminuyendo la producción de CSPGs por parte de los astrocitos como se ha visto in vitro. Las vías de TGF-ß/SMAD y PI3K-Akt-mTOR, así como el receptor CB2 parecen estar implicados en estos efectos.