Estudio de la policiclonalidad de aislamientos clínicos de micobacterias de crecimiento rápido y caracterización de diferentes factores de patogenicidad

Resumen

En la actualidad, sólo esta descrito el potencial patógeno para unas cuantas especies dentro del grupo de las micobacterias de crecimiento rápido (MCR), siendo Mycobacterium abscessus, Mycobacterium chelonae y Mycobacterium fortuitum responsables del 90% de las infecciones y la infección respiratoria la manifestación clínica más común. La policlonalidad se define como los diferentes genotipos de una misma especie bacteriana y existen estudios de laboratorio y modelos matemáticos que apoyan este hecho. La hipótesis actual es que los diferentes genotipos de las micobacterias se corresponderían con sus fenotipos patógenos, y se podría establecer una relación con la progresión de la enfermedad. El objetivo principal fue el estudio de la presencia de policlonalidad en los aislamientos clínicos de MCR y la relación de este fenómeno con la especie, el significado clínico y las características fenotípicas y su influencia en propiedades que potencian la patogenicidad como la sensibilidad antimicrobiana, la capacidad de penetración intracelular y la capacidad de formar biopelículas. Las 20 colonias de los aislamientos originales identificados se seleccionaron y subcultivaron aleatoriamente. La relación genotípica se estudió mediante RAPD, basada en la técnica PCR. El significado clínico se determinó siguiendo los criterios de la Sociedad Torácica Americana. Se describió la morfología de la colonia y la velocidad de crecimiento. La sensibilidad se llevó a cabo mediante microdilución en caldo (protocolo CLSI), para 6 antimicrobianos. La capacidad de invasión celular se determinó siguiendo el protocolo de la evaluación de la capacidad invasiva empleando el modelo de microcolonias en fibroblastos diploides humanos y la capacidad de desarrollar biopelículas mediante un modelo que permitió calcular la superficie cubierta. De los 34 aislamientos, 23 fueron clínicamente significativos y 7 resultaron ser policlonales. La monoclonalidad se relacionó con el significado clínico y con el grupo abscessus-chelonae (más patógeno). El grupo fortuitum (menos patógeno) se relacionó con los estados de colonización o contaminación y la policlonalidad. Los aislamientos monoclonales presentaron mayor tendencia a la resistencia a antibióticos, especialmente al ciprofloxacino. La capacidad invasiva se relacionó con la monoclonalidad y el significado clínico así como con el grupo asbcessus-chelonae mientras que la formación de biopelículas, bajo las condiciones del estudio, se relacionó con la policlonalidad y el grupo fortuitum. Serán necesarios más estudios para dilucidar la exacta dimensión del fenómeno de la policlonalidad en las infecciones causadas por las MCR.