Impacto clínico de las aberrancias inmunofenotípicas y perfil mutacional en síndromes mielodisplásicos

Resumen

Los síndromes mielodisplásicos (SMD) constituyen un grupo heterogéneo de entidades clínicas. La citomorfología y la citogenética constituyen el estándar para el diagnóstico y pronóstico de pacientes con sospecha de SMD, aunque presentan ciertas limitaciones. Nuestro objetivo consiste en desarrollar una metodología de análisis por citometría de flujo para diferenciar entre pacientes con SMD y otros con citopenias de diferente origen, y evaluar la aplicabilidad de la técnica de secuenciación masiva de nueva generación (NGS) e investigar la utilidad para el diagnóstico molecular y pronóstico de estos pacientes. Para el análisis inmunofenotípico se seleccionaron 55 casos de SMD, y 51 controles con citopenias de diversos orígenes (sobre todo inmunes, hiperesplenismo, toxicidad farmacológica). El estudio molecular se realizó con el secuenciador Ion Torrent Proton (Life Technologies. Palo Alto, California). Se estudió el perfil mutacional de 106 SMD y de 12 controles, mediante secuenciación masiva paralela de 34 genes relacionados con patologías mieloides. La aplicación de la recomendación del grupo de trabajo de EuropeanLeukemia Net del análisis inmunofenotípico en nuestros pacientes y controles, nos permitió diferenciar a los pacientes con SMD mediante algunos parámetros consistentes. Evaluamos la herramienta de base de datos de maduración del software Infinicyt (Cytognos. Salamanca, España) como test diagnóstico para discriminar entre pacientes con SMD y otros con citopenias de origen no clonal, resultado un test diagnóstico fiable, y además con implicaciones pronósticas, correlacionando el número de alteraciones inmunofenotípicas con el riesgo pronóstico. En el análisis del perfil mutacional por secuenciación masiva se identificaron un total de 198 mutaciones puntuales en 94 de los 106 pacientes (88.7por ciento). Las mutaciones más frecuentes correspondieron a: TET2 (32,1por ciento), SF3B1 (17,9por ciento), ASXL1 (17por ciento), DNMT3A (14,2por ciento), TP53 (11,3por ciento), y RUNX1 (10,4por ciento), y el resto con frecuencias mayor o igual 0por ciento, resultados similares a los publicados en otras series. Encontramos cinco genes en los que el estado mutacional presentaba impacto en la supervivencia global (TP53, RUNX1, EZH2, KRAS, y U2AF1). Tanto estos genes como adicionalmente otros reconocidos con valor pronóstico (ASXL1, ETV6) marcaban un impacto negativo en la supervivencia, incluso estratificando según grupos de riesgo. En conclusión, tanto la citometría de flujo como la secuenciación masiva, no sólo nos ayudan en el diagnóstico de pacientes con SMD, sino que además aportan información pronóstica relevante que habrá que integrar en un futuro.