Diagnóstico y pronóstico del cáncer colorrectal mediante la cuantificación de autoanticuerpos en suero de pacientes

Resumen

El cáncer colorrectal (CCR) es el cáncer de mayor mortalidad en los países desarrollados. Por tanto, el CCR supone un serio problema de salud que requiere mejoras en el diagnóstico temprano de la enfermedad y un pronóstico más preciso de la evolución del paciente. La respuesta inmunológica humoral que desarrollan los pacientes con cáncer frente a proteínas alteradas durante la formación y progresión tumoral ofrece una serie de biomarcadores que podrían ayudar a mejorar la supervivencia de la enfermedad al permitir un diagnóstico temprano de la patología y mejorar el manejo del paciente ya diagnosticado. El objetivo final de la Tesis Doctoral fue obtener un panel de autoantígenos asociados a tumor (AAT) específicos de CCR útil para el diagnóstico y pronóstico de los pacientes de la enfermedad. Para ello, partimos de un panel de AAT descubiertos a través de micromatrices de proteínas utilizando un reducido número de muestras. Durante la Tesis Doctoral, se optimizó la expresión recombinante de los antígenos previamente descubierto. Para demostrar la utilidad de los autoanticuerpos para el diagnóstico temprano de la patología se estudió la respuesta humoral frente a CCR en modelos murinos de cáncer colorrectal. Los autoanticuerpos específicos de CCR se detectaron en etapas tempranas de la enfermedad y sus niveles aumentaron en paralelo a la progresión tumoral, demostrando su potencial diagnóstico. También pudimos describir las alteraciones que dan lugar a la respuesta inmune humoral. Con el objeto de mejorar el diagnóstico de CCR, pusimos a punto la detección simultánea de 9 autoanticuerpos frente a AAT de CCR mediante microesferas Luminex, lo que mejoró respecto a ELISA. Para validar el ensayo y encontrar la mejor combinación de AAT para la detección de CCR se cribaron 307 muestras de sueros de pacientes de CCR y controles. Aunque la sensibilidad, especificidad y valor predictivo de los AAT individuales fueron insuficientes para su uso como biomarcadores, su combinación permitía discriminar entre pacientes de CCR y controles con un AUC de 89.7 por ciento, por lo que podría ser utilizado para cribado poblacional en rutina clínica. Además, el test presentó una gran capacidad para la detección temprana de los pacientes en estadios I y II de CCR. Finalmente, evaluamos la asociación de la respuesta humoral frente a CCR con el pronóstico de los pacientes utilizando una cohorte de 95 sueros de pacientes de CCR que tenían seguimiento hasta 150 meses desde el diagnóstico. El panel de AAT seleccionado permitió pronosticar las recaídas o fallecimiento de los pacientes. En conjunto, en esta Tesis Doctoral hemos verificado la utilidad de los autoanticuerpos para el diagnóstico y pronóstico de pacientes de CCR. La detección de los autoanticuerpos mediante Luminex podría ser trasladada a clínica para el cribado poblaciones de riesgo, y obtener un pronóstico del riesgo de recaida y fallecimiento para personalizar su tratamiento.