Pérfil clínico de los pacientes alérgicos al hámster siberiano ("Phodopus sumgonus") e identifiación de sus alérgenos

Resum

La prevalencia de la alergia al hámster Siberiano (HS) está aumentando; sin embargo, los alérgenos de este animal aún no han sido identificados. Se estudiaron 21 pacientes con alergia a hámster Siberiano. Se realizaron pruebas cutáneas (SPT) frente a extractos de epitelio, saliva y orina obtenidos de hámster Siberiano, hámster dorado (Mesocricetus auratus), Europeo (Cricetus cricetus) y Roborovskii (Phodopus roborovski). Se realizaron dos provocaciones nasales (PNE) y dos bronquiales específicas (PBE) con extracto de pelo de HS, como también un test de exposición en cámara de provocación inhalativa de 7 m3. Se realizaron ensayos SDS-PAGE, Immunoblotting, Immunoblotting-inhibición y ELISA. Se obtuvo la secuencia de varios péptidos de las bandas fijadoras de IgE mediante espectrometría de masas. A partir de RNA obtenido de glándula salival se clonó el alérgeno principal. Se determinó la actividad ¿in vitro¿ de la proteína recombinante generada mediante el test de activación de basófilos. Las pruebas cutáneas (prick test) con los extractos de hámster Siberiano fueron positivas en todos los pacientes. Cinco pacientes tuvieron además pruebas positivas frente a los extractos de hámster Roborovski. La PNE y la PBE como también el test de exposición demostraron la capacidad de los extractos alergénicos provenientes de HS de inducir cambios obstructivos e inflamatorios en los pacientes. El Immunoblotting reveló la presencia de 3 bandas fijadoras de IgE de 18, 21 y 23 kDa en los tres extractos analizados, resultando ser isoformas de una misma proteína. Se obtuvo la misma secuencia parcial de aminoácidos en las tres bandas identificadas que correspondía a una lipocalina. Se clonó y expresó en E. Coli el alérgeno principal. La proteína recombinante del HS fue reconocida por los sueros de todos los pacientes. Se demostró la inhibición total entre los diferentes extractos de HS. Hubo una inhibición parcial entre los extractos de hámster Siberiano y los del hámster Roborovski, mientras no hubo entre HS, dorado y el Europeo. El test de activación de basófilos demostró actividad ¿in vivo¿ tanto del extracto nativo como de la proteína recombinante. Se identificó el alérgeno principal de hámster Siberiano y se demostró una reactividad cruzada parcial entre hámster Siberiano y Roborovski. Se secuenció una proteína recombinante del hámster Siberiano por primera vez correspondiendo a una lipocalina.