Estudio de la saliva de "Phlebotomus perniciosus" y su potencial aplicación en la epidemiología y control de "Leishmania infantum"

Résumé

La saliva de los flebotomos contiene sustancias antihemostáticas e inmunomoduladoras y juega un papel importante en el establecimiento de la infección por Leishmania spp., por lo que recientemente las proteínas de la saliva han surgido como posibles candidatos a vacunas frente a la leishmaniosis además de como marcadores epidemiológico de exposición a las picaduras de los flebotomos. El objetivo principal de este trabajo es profundizar en el estudio de la saliva de Phlebotomus perniciosus, principal vector de la leishmaniosis en el sur de Europa. Hemos descrito, por primera vez, el mapa proteómico de la saliva de este insecto combinando las técnicas de electroforesis bidimensional y espectroscopía de masas y, hemos identificado las proteínas antigénicas para diversos animales de laboratorio. Así mismo, se ha estudiado la cinética que siguen los anticuerpos antisaliva en ratones y en conejos expuestos experimentalmente a las picaduras de P. perniciosus. Se construyó una genoteca de ADNc a partir de las glándulas salivales de P. perniciosus, identificando moléculas inmunogénicas que, posteriormente, se han clonado, expresado y purificado. Las tres proteínas recombinantes producidas se han evaluado como marcadores de exposición a las picaduras de los flebotomos. Finalmente, utilizando las proteínas recombinantes y el extracto salival completo se ha realizado una evaluación, mediante ELISA, de la exposición de reservorios domésticos y silvestres a las picaduras de P. perniciosus procedentes de una zona de Madrid en el contexto de un brote epidémico de leishmaniosis visceral.