Estudio de fagos de "Helicobacter pylori" por métodos fenotípicos y genotípicos

Resumen

Hasta la fecha son muy escasas las comunicaciones relativas a los fagos de Helicobacter pylori. Los bacteriófagos tienen un papel clave en la diversidad genética y la adaptación de las especies a su nicho ecológico. Además participan en la transmisión horizontal de material genético con lo que contribuyen a la diseminación de factores de virulencia y mecanismos de resistencia. Esta tesis estudia mediante distintos métodos la presencia de fagos y secuencias genéticas relacionadas con ellos en aislamientos clínicos de H. pylori y trata de relacionar estos resultados con conocidos factores de virulencia y datos de resistencia a los antibióticos empleados habitualmente en la infección por H. pylori. La inducción mediante mitomicina C mostró una prevalencia superior al 35% de cepas lisogénicas que nunca antes había sido comunicada. Una de estas cepas fue cultivada en grandes cantidades de medio líquido, se indujo la liberación de bacteriófagos y se logró aislar el material genético de los mismos. Además, se secuenció el genoma completo dicha cepa y se comprobó la presencia de genes relacionados con fagos y de secuencias CRISPR (un mecanismo de resistencia implicado en la resistencia a las infecciones por bacteriófagos). Estos resultados demuestran la influencia de los bacteriófagos en el genoma de esta cepa lisogénica y unidos a la ya citada prevalencia de cepas lisogénicas, permiten concluir que la importancia de los bacteriófagos en Helicobacter pylori había sido subestimada hasta ahora. No se demostró ninguna relación estadísticamente significativa entre la lisogenia y la resistencia a antibióticos o la presencia de los factores de virulencia mejor conocidos de H. pylori aunque sí se observaron ciertas tendencias que quizá podrían confirmarse en estudios con un mayor número de cepas. El desarrollo de un sistema sencillo y eficaz de inducción, el aislamiento de material genético de origen fágico y la secuenciación de una cepa lisogénica de H. pylori abren interesantes vías de investigación para el futuro.