Efecto del fipronil sobre enzimas metabolizantes en hígado de rata

Resumen

Este trabajo es el primero que describe al insecticida FIPRONIL como un inhibidor/inductor de enzimas metabolizantes de xenobióticos de Fase I. El trabajo describe el efecto del fipronil sobre enzimas metabolizantes de Fase I de las subfamilias CYP1A, CYP2B, CYP2C, CYP2E y CYP3A en ratas adultas macho Wistar. Se evaluaron diferentes actividades enzimáticas, utilizando una combinación de sustratos con lo que fue posible examinar diferentes isoenzimas del P450 en microsomas hepáticos, finalmente se determinaron por medidas directas de Western blot la posible inducción de las isoenzimas CYP1A1 y CYP1A2. Se estudió el contenido de citocromo P450 y citocromo b5, y la actividad de las enzimas NADPH- citocromo c(P450) reductasa, y de las isoenzimas CYP1A1, CYP1A2, CYP2A1, CYP2B1/2, CYPC11, CYP2E1 y CYP3A1/2. El fipronil a las dosis administradas (5, 10 y 15 mg/kg/día, por vía oral, durante 6 días consecutivos) no causó mortalidad en los animales. Tampoco originó ningún efecto en la ganancia de peso corporal ni en la ingesta de alimento. Tras el tratamiento y sacrificio de los animales tampoco se observó ningún efecto sobre el peso absoluto del hígado, sobre la razón peso corporal/peso de hígado, ni sobre el contenido de proteínas totales microsomales en comparación con los animales controles. El fipronil a las dosis administradas (5, 10 y 15 mg/kg/día, por vía oral, durante 6 días consecutivos) originó en microsomas hepáticos, de forma dosis-dependiente, un incremento estadísticamente significativo del contenido de citocromo P450, de la actividad de la enzima NADPH citocromo c reductasa, de la actividad de la enzima anilina hidroxilasa (expresión de la isoenzima CYP2E1) y de las actividades de las enzimas etoxiresorufina O-deetilasa y metoxiresorufina O-demetilasa, expresión de las isoenzimas 1A1 y 1A2. Fipronil (5, 10 y 15 mg/kg/día, vía oral, 6 días) en ratas también origina de forma dosis dependiente un incremento estadísticamente significativo en la formación de metabolitos hidroxilados de la testosterona; origina un incremento de las actividades de las enzimas testosterona 16Beta-hidroxilasa (expresión de la isoenzima 2B1/2) y de la testosterona 6Beta-hidroxilasa (expresión de la isoenzima 3A1/2). Este efecto fue confirmado para las enzimas pentoxiresorufina O-depentilasa y la eritromicina N-demetilasa. Fipronil (5, 10 y 15 mg/kg/día, vía oral, 6 días) de forma dosis-dependiente en ratas inhibe significativamente las actividades de las enzimas testosterona 2alfa- y 16alfa-hidroxilasas (expresión de la isoenzima 2C11). Fipronil solo a las dosis mas alta ensayada (15 mg/kg/día, vía oral, 6 días) alteró la actividad de la enzima ácido laúrico 12-hidroxilasa originando una ligera inhibición. También fipronil a las dosis de 5 y 10 mg/kg/día originó una ligera inhibición de la actividad de la enzima ácido láurico 11-hidroxilasa. Ambos resultados reflejan una ligera inhibición de la subfamilia CYP4A, y en particular de la isoenzima 4A1. El tratamiento con fipronil, también provoca de forma dosis-dependiente una reducción estadísticamente significativa en la Beta-oxidación de la palmitoil-CoA en hígado. Estos resultados tomados en conjunto sugieren señalar que fipronil no parece comportante como un proliferador de peroxisomas. Fipronil (5, 10 y 15 mg/kg/día, vía oral, 6 días) no causó alteraciones en la actividad de las enzimas de Fase II, enzima UDP-glucuroniltransferasa, ni en la enzima glutation S-transferasa. Finalmente, los resultados obtenidos de nuestro estudio proporcionan una información relevante de una nueva acción tóxica del fipronil "Capacidad de inducción e inhibición de enzimas P450"; nuestros resultados son datos importantes para ser incorporados a una nueva evaluación del riesgo de este insecticida, principalmente para ser incorporados en las fases de identificación de la peligrosidad y caracterización del riesgo.