Análisis de c-5 esterol desaturasas de aspergilus fumigatusfunción en la biosíntesis de ergosterol e implicación en la sensibilidad a los antifúngicos

Resumen

En el grupo de investigación se han descrito dos genes de Aspergillus fumigatus denominados cyp51A y cyp51B que codifican para la 14-alfa esterol demtilasa, enzima diana de los azoles. Mutaciones puntuales en algunas cepas de Aspergillus fumigatus resistentes a los azoles ha sido descrita como la causante de su resistencia cruzada a azoles en esas cepas mutantes. Continuado con esa línea de investigación, en la búsqueda de mecanismos de resistencia a los antifúngicos, se ha estudiado otros mecanismos de resistencia que pudieran explicar fenotipos de resistencia en cepas de A.fumigatus no caracterizados. Un mecanismo bien definido, fundamentalmente en Sacharomyeces cersisiae y Cándida albicans, consiste en una disminución, ausencia o deficiencia en la actividad del enzima C-5 esterol desaturasa. Este enzima actúa sobre la vía de síntesis del ergosterol y esta codificada por el gen ERg3. En el trabajo presentado se ha realizado la identificación y caracterización de tres genes de A.fumigatus (erg3A, erg3B, y erg3C) que codifican posibles enzimas C-5 esterol desaturasas (Erg3A, Erg3B y Erg3C). Se ha comprobado que los tres genes presentan una sola copia en el genoma de A.fumigatus, y que los tres se expresan en condiciones normales de crecimiento. Se ha realizado un estudio funcional de las encimas C-5 esterol desaturasas de A.fumigatus mediante la creación de cepas de defectivas en los genes erg3A, erg3B y ergC. De tal forma que se ha estudiado la viabilidad de las cepas mutantes, su posible implicación en la resistencia a los azoles y a la anfoterciina B y su implicación en la biosíntesis de ergosterol en A.fumigatus. Por otro lado, la existencia en A.fumigatus de dos enzimas Cyp51 y tres enzimas C-5 esterol desaturasas llevó a replantear la vía clásica de síntesis del ergoseterol descrita en S.cervisiae. En este trabajo se describe por primera vez, la vía de síntesis del ergosterol en A.fumigatus.