Proyecciones centrales de los nervios laríngeos en un modelo experimental de degeneración-regeneración de rata adulta

Resumen

En la actualidad el factor limitante para conseguir una recuperación plenamente funcional de la laringe, tras un trasplante, no es ni la revascularización ni el rechazo, sino conseguir una reinervación funcional. En los procesos de reinervación los axones en regeneración inervan grupos musculares inadecuados, con el resultado del fenómeno conocido como sincinesia, que se traduce en una movilidad glótica inadecuada. La posibilidad de alcanzar una reinervación funcional en los transplantes y/o parálisis laríngea, necesita por tanto, del conocimiento exhaustivo de los acontecimientos morfológicos que ocurren a nivel periférico (nervios y músculos) y central. Por ello se hace necesario el conocimiento de los componentes funcionales de los nervios laríngeos y de sus núcleos de representación central, así como de la reorganización morfofuncional que se produce tras una lesión de los nervios laríngeos. Mientras que existen diferentes estudios sobre los acontecimientos que suceden a nivel periférico, sólo en dos trabajos de la literatura consultada se hace mención a la reorganización morfológica y funcional que se produce en el núcleo ambiguo (NA), tras una lesión en el nervio laríngeo recurrente (NLR). En el cobaya se ha descrito la pérdida de la somatotopía y un descenso inicial en el número de neuronas en el NA, que aumenta con el tiempo de reinervación. En la rata se ha descrito también la pérdida de la organización funcional de los distintos músculos laríngeos dentro del NA, y un descenso en el número de neuronas. La pérdida de la somatotopía se ha interpretado como la base del fracaso en la reinervación selectiva. Para llevar a cabo esta tesis se han empleado ratas Sprague-Dawley machos jóvenes. El retrotrazador neuronal utilizado ha sido BDA (dextranaminas biotinadas), de bajo peso molecular. Los animales se han distribuido en una serie control en la que se estudiaban los componentes funcionales de los nervios laríngeos, y una serie experimental en la que se estudiaba la reorganización neuronal tras lesión nerviosa. Serie Control. Consta de 14 animales en los que se trazó con BDA 3Kd el NLR, el nervio laríngeo superior (NLS) o ambos comtralateralmente, sin previa lesión. Tras 7 días se perfundieron intracardiacamente (paraformaldehido 4% en PB). El tronco del encéfalo fue extraído, crioprotegido con sacarosa 15% y 30%, y cortado en el criostato en secciones de 50 um. La presencia del BDA se detectó mediante la incubación con avidina-biotina-peroxidasa y el posterior revelado con diaminobenzidina intensificada con níquel. Serie Experimental. Dividida en 4 grupos, de 10 a 16 animales cada uno, en los que se axotomizó el NLR izquierdo. El nervio axotomízado se trazó con BDA 3Kd, distalmente a la zona lesionada, una vez que transcurrían 4 intervalos de tiempo desde la lesión: entre 21 y 28 días, entre 42 y 60 días, entre 90 y 120 días, y entre 150 y 180 días. Una vez trazado el nervio con el dextrano, distalmente a la lesión, la obtención de las muestras y el procesado de las mismas fueron idénticos a los del grupo control. En ambas series se analizó el número de neuronas marcadas, contadas en cada corte a 20 aumentos. Una serie de parámetros morfométricos de los somas (área, perímetro, longitud, anchura, factor de forma y diámetro equivalente) se evaluaron mediante el software Visilog 5.4, y las diferencias entre ambos grupos se analizaron mediante un test t de student. El NLS en la rata es un nervio mixto, que vehiculiza fibras aferentes viscerales generales (cuyos cuerpos neuronales se localizan en el ganglio Inferior del nervio vago, y sus prolongaciones centrales ingresan en el tracto solitario para terminar en el núcleo del tracto solitario), eferentes viscerales especiales (que inervan el músculo cricotiroideo, y que tienen su origen real en el núcleo ambiguo), fibras eferentes viscerales generales (originadas en el núcleo dorsal del vago, es decir, fibras de neuronas parasimpáticas preganglionares que inervan la mucosa secretora de la laringe). El NLR, en la rata, es un nervio puramente motor, cuyas fibras eferentes viscerales especiales tienen su origen real en el NA. Parece, por tanto, que el NLR no es un nervio mixto, lo que estaría contradiciendo de esta forma la información publicada hasta ahora sobre el tema en la rata. La sección del NLR en la rata comporta una disminución del número de neuronas del NA. El número de neuronas en los grupos experimentales aumenta de manera brusca entre los grupos experimentales 21-28 días y el resto, aunque a partir del grupo 42-60 el aumento es paulatino, de manera que en el grupo 21-28 hay un 10% de neuronas marcadas con respecto al grupo control, y hay un 32%, 38% y 42% de neuronas marcadas con respecto al grupo control en los grupos 42-60, 90-120 y 150-180 días respectivamente. La sección del NLR en la rata no afecta al tamaño ni a la forma de las neuronas del NA, ya que las diferencias entre el grupo control y los experimentales no son significativas.