Estudio de la regulación del coactivador transcripcional pgc-1alfa por óxido nítrico en células endoteliales

Resumen

El principal objetivo del presente trabajo es el estudio de la regulación por óxido nítrico (NO) del coactivador transcripcional PGC-1alfa y de los genes pertenecientes al sistema de protección mitocondrial frente a ROS (MnSOD, CitC, Prx3, Prx3, Prx5, Trx2, TrxR2, UCP-2 y Cat). El análisis de la expresión de PGC-1 y de sus genes diana tras tratamientos con DETA-NO, indican que al emplear dosis fisiológicas de DETA-NO, la expresión de estos genes disminuye tras tiempos cortos de tratamiento (menor 24 h) y aumenta al incrementar el tiempo de experimentación (mayor de 24 h). Asimismo, la regulación negativa del NO sobre la expresión de estos genes parece estar mediada por la vía de PKG y muy probablemente, por la vía de PI3K. La relevancia fisiológica de la regulación por NO se refleja al comprobar que la ausencia crónica de NO (ratones deficientes en la enzima eNOS) se traduce en la reducción drástica de la expresión tanto de PGC-1 como de los genes pertenecientes al sistema de protección mitocondrial frente a ROS. La segunda parte del trabajo se centra en el estudio del promotor murino de PGC-1, con la finalidad de tratar de identificar elementos de respuesta al NO en dicho promotor. Comprobamos que la actividad del promotor de PGC-1 se encuentra disminuida tras tiempos cortos de tratamiento con DETA-NO y además, este efecto esta medida por las vías de cGMP y PI3K. Asimismo, detectamos la existencia de elementos de respuesta al NO en la región de 1,3 Kb upstream del punto de inicio de la transcripción, región donde se han descrito sitios de unión para factores de transcripción como es el caso de FOXO3a. Proponemos que FOX3a es el factor de transcripción a través del cual el NO regula negativamente la actividad del promotor de PGC-1.