Estudio molecular de la alfa talasemia no deleción

Laburpena

INTRODUCCIÓN Las alfa talasemias constituyen un grupo de enfermedades de origen genético, causadas por una disminución o ausencia en la síntesis de la cadena alfa de globina. En la mayoría de los casos esta alteración en la síntesis es debido a delecciones que afectan a uno o a los dos genes, alfa, siendo poco frecuente los casos debidos a mutaciones puntuales, inserciones o delaciones de pocos pares de bases, los cuales se han denominado alfa talasemias no delección. OBJETIVO En esta investigación se plantea el objetivo de determinar la incidencia de la alfa talasemia no deleción en los pacientes con alfa talasemia, utilizando técnicas de biología molecular. MATERIAL Se han estudiado 517 individuos en el período comprendido entre Enero del 2001 a Diciembre del 2003, pacientes que presentaban microcitosis para el diagnóstico de alfa talasemia en los que previamente se había descartado feropenia y presentaba Hb A2, Hb F y EEF de Hbs normales. MÉTODOS Se han estudiado los 2 tipos de alta talasemia no deleción mas frecuentemente descritos en el Mediterráneo: 1,- alfaHph debida a la delección de 5bp en el IVS I 2,- AlfaNco debida a un cambio en el codón de iniciación del gen. Para su análisis se amplifica de forma selectiva el gen alfa2 y el gen alfa1 por PCR y luego se realiza una digestión con al enzima de restricción específica, Hph I para la mutación alfaHph y Nco I para alfaNco. El estudio de la alfa talasemia delección se hizo por Southern Blot con las enzimas de restricción Bam HI y BgI LL y las sondas alfa y en el caso de las alfa+, completándose el estudio con diversas enzimas y sondas en los casos restantes resultaron positivos para la alfaNco del gen alfa2, 10 heterocigotos, 1 homocigoto y 1 doble heterocigoto asociado a la deleción 4,2 kb. CONCLUSIÓN La alfa talasemia no deleción representa mayor 8% de los casos de alfa talasemia en nuestro medio. La alfaHph es el tipo