Emergencia de los procesos de diferenciación linfoide en el embrión post-gastrulación del ratón

Résumé

En la presente tesis se ha descrito los primeros procesos de diferenciación de células linfoide tipo B y NK-T/NK en el primer tercio de la gestación del ratón. La linfopoieis B se origina a partir de día 10 de gestación localizada en regiones intra-embrionarias como la Esplanchnopleura-Paraaortica (Ep-P/AGM), el Hígado Fetal (HF), y en menor medida en el Saco Vitelino (SV). Se describe aquí el primer progenitor unipotencial B, como una población CD117+AA4.1+CD19+CD45R-, PAX-5 dependiente. Estos progenitores son capaces de establecer líneas celulares B en cultivo, sobre la línea estromal ST2 en presencia de IL-7. Los cultivos sobreviven en estas condiciones in vitro durante largo tiempo, sin necesidad de ser transformadas. Estos datos muestran que la aparición de la linfopoiesis B es anterior (días 10-11) a lo hasta ahora descrito (día 14), y su aparición es próxima a la de las primeras HSC detectadas en el embrión (día 8). Utilizando estos mismos cultivos, con progenitores totales de SV , observamos la emergencia de líneas celulares de aspecto polarizado y fenotipo CD117+CD90+CD19-CD1b-. Estas líneas no B, se establecían igualmente en cultivo en presencia de IL-7 (4-6 meses), pero su crecimiento se incrementaba positivamente con IL-2. Estudios más amplios de su fenotipo nos han permitido caracterizarlas con NK-T/NK: NK1.1+CD49b+CD122+. Además se han detectado poblaciones CD3+alfa GalCerCD1d+, junto con la expresión de Valfa14 por RT-PCR, estas líneas NK-T/NK, se generan preferentemente a partir de progenitores localizados en el SV (día 9), y posteriormente en otros nichos como Ep-P/AGM e HF a días 10-11. En este trabajo se ha descrito una diferenciación NK-TNK, previa a lo hasta ahora aceptado (día 13 de gestación) cuyo origen fundamentalmente es el SV. Este trabajo caracteriza poblaciones progenitoras a tiempos tempranos en la ontogenia, así como la compartimentalización específica de la linfop