Análisis de poblaciones th1/th2 mediante la detección de citocinas intracelulares en la leucemia linfoide crónica b (llc-b)

Résumé

La leucemia linfoide crónica de células B es una neoplasia caracterizada por una acumulación de linfocitos B monoclonales en sangre, médula ósea, ganglios linfáticos, además de otros órganos. Se ha sugerido que el acúmulo de la población clonal, es debido a una apoptosis disminuida más que a una elevada proliferación. La progesión de la enfermedad se ha asociado con inmunodeficiencias secundarias y con un elevado riesgo de infecciones, que podrían obedecer a alteraciones en la producción de citocinas, tanto por el clon leucémico como por la población residual de linfocitos T. Las citocinas participarían en circuitos autocrinos o paracrinos en la expansión de los linfocitos B de LLC mediante la inducció o inhibición de la proliferación celular y la apoptosis. En este trabajo se ha estudiado la expresión intracelular de citocinas mediante citometría de flujo en los linfocitos B leucémicos y en los linfocitos T CD4+ y CD8+ ex vivo y tras la activación con ésteres del forbol e ionomicina. De forma simultánea, se ha estudiado la expresión de citocinas en linfocitos B y T de individuos sanos. Los resultados obtenidos muestran que los linfocitos B leucémicos, a diferencia de los individuos sanos, se encuentran preactivados produciendo citocinas tipo 2 (IL-4, IL-10) de forma espontánea que podrían inducir supervivencia. Tras estimulación in vitro, tienen capacidad para producir elevados niveles de citocinas tipo 1 (TNF-alfa) contribuyendo a la expación clonal. Los linfocitos T CD4+ de pacientes de LLC-B, tras activación muestran disminuida respuesta tipo 1 con respecto a los individuos sanos, pudiendo explicar su estado de inmunodeficiencia. Del mismo modo que la población leucémica, los linfocitos T CD8+ se encuentran preactivados produciendo citocinas tipo 2 de forma espontánea. Tras activación in vitro muestran una marcada respuesta tipo 1 (TNF-alfa e IFN-gamma) que podría contribuir en la expansión