Análisis inmunoquímico y funcional de la variabilidad de las cadenas CD3[épsilon] del complejo TCR-CD3

Resumen

Los datos actuales del receptor de antígeno del linfocito T (complejo TCR/CD3) han sido obtenidos utilizando diversos tipos de células o líneas celulares y meditan diferentes aproximaciones experimentales, y sería razonable concluir que el complejo TCR/CD3 es una estructura constante cuyos componentes, exceptuando las regiones variables del TCR. Son iguales en todos los linfocitos T. Por el contrario, habíamos detectado previamente diferencias en la secuencia amino-terminal de CD3 epsilon y con interacciones TCR-CD3 más débiles. En esta tesis mostramos que los complejos TCR/CD3 de la superficie de los linfocitos T de ratón y de diferentes líneas celulares expresan distintas cadenas de CD3 epsilon con distinto punto isoeléctrico, que se corresponden con los puntos isoeléctricos teóricos de cadenas que han perdido uno o dos residuos cargados negativamente del extremoamino-terminal de esta proteína. Asimismo, diferentes líneas celulares presentan distinta proporción de isoformas de CD3 epsilon, correlacionándose la avidez de la unión del anticuerpo YCD3.1 con la abundancia de cadenas de punto isoeléctrico alto. Por otra parte, hemos observado la existencia de complejos TCR/CD3 mono y multivalentes en estas líneas celulares, siendo mayor la proporción de cadenas completas en los complejos monovalentes. Nuestros datos indican también que los residuos ácidos del extremo amino-terminal de CD3 epsilon están implicados en la interacción con el TCR, y que existen distintas proteasas implicadas en el proceso de degradación de esta proteína. Así utilizando un inhibidor de metaloproteasas hemos observado una disminución en la degradación de CD3 epsilon y por el contrario, utilizando un inhibidor de aminopeptidasas hemos observado un aumento de la degradación. La existencia de distintas cadenas de CD3 epsilon da lugar a diferentes consecuencias funcionales. Por un lado existen diferencias en la estructura de los complejos TRC/D3, d