Generación y análisis de ratones transgénicos con expresión inducible del marcador de progresión tumoral snail

Resumen

En trabajos anteriores del laboratorio se ha demostrado que la familia génica Snail está implicada en la inducción de la transición epitelio-mesénquima(TEM) tanto durante el desarrollo embrionario (Nieto y col.1994;Del Barrio y Nieto,2002)como en la progresión tumoral (Cano y col.,2000;Blanco y col., 2000).Esta función se realiza ,al menos en parte , por la represión directa de la transcripción del gen de la cadherina E, si bien se piensa que sebe tener dianas adicionales. Estudios funcionales en el embrión de ratón han mostrado que Snail es fundamental para la TEM,pues los ratones mutantes mueren enetapas temperaturas de formación de mesodermo debido a su incapacidad de llevar a cabo esta transición (caver y col.2001).Esta inviabilidad hace imposible el estudio de la función de Snail en procesos de desarrollo más tardío (formación de cresta neural o cartílagos entre otros)o en procesos patológicos en el adulto.Por ese motivo,la finalidad de este proyecto ha sido la puesta a punto de un sistema de expresión inducible de Snail en el raton. En este trabajo se describen un sistema de expresión condicionada del factor de transcripción Snail, consistente en una construcción plasmatica que contiene la región codificante de dicho factor de transcripción unida a un dominio de unión a estrógenos , previamente mutado, que presenta elevada afinidad por un estrógeno sintético, el 4-hidroxi-tamoxifeno.Tras su administración , el estrógeno es capaz de inducir la actividad de la proteína Snail por su traslocación tumoral. Hemos inducido la actividad de Snail en tres momentos del desarrollo de los ratones. En embriones en estadios de preimplantación , la activación de Snail va acompañada de la pérdida gradual de la cadherina E y la consecuente descompactación de los oocitos provenientes de los ratones trasgénicos.Este fenotipo debería ser suprimido por represores de Snail , por que proponemos el cultivo