Implicación de la proteína E2 del virus de la hepatitis C en las primeras etapas de la infección

Resumen

El virus de la Hepatitis C (HCV) es la principal causa de hepatitis aguda y enfermedad hepática crónica, incluyendo cirrosis y cáncer hepático. Este virus ha sido clasificado como perteneciente al nuevo género Hepacivirus perteneciente a la familia Flaviviridae. Dada la trascendencia sanitaria de la hepatitis C, resulta necesaria la búsqueda de nuevas terapias así como de una vacuna efectiva para la prevención de la enfermedad. Los actuales datos controvertidos relativos a la forma de entrada en la célula del virus resultan inquietantes, siendo necesario profundizar en los procesos que median la unión viral, así como en la entrada y fusión de las membranas viral y celular, con el fin de contribuir al conocimiento de la virología molecular de la hepatitis C. Los bajos niveles de partículas virales en el suero de pacientes infectados y la falta de un sistema de replicación in vitro del virus han impedido un análisis directo de las proteínas de la envoltura del HCV, y en concreto, de la proteína E2. Por ello, en primer lugar se han realizado diversas pruebas de expresión con el fin de encontrar un sistema de expresión para la proteína E2, que permitiese obtener suficiente cantidad de proteína soluble tras su purificación para poder llevar a cabo la posterior caracterización estructural mediante técnicas espectroscópicas. Además, con la proteína en una conformación nativa, se ha realizado la caracterización antigéncia así como los estudios dirigidos a conocer el estado de oligomerización y el patrón de glicosilación. A continuación, se han determinado las propiedades fusogénicas de E2, planteando diversos ensayos como la agregación de vesículas, la mezcla de lípidos y la pérdida de l contenido intravesicular, con distintas especies fosfolipídicas, así como en distintas condiciones de pH y presencia/ausencia de colesterol. Estas interacciones inducen cambios en los fosfolípidos que se han estudiado mediante medidas