Desarrollo de métodos genéricos de amplificación genómica y aplicación en el diagnóstico de infección pro herpesvirus en patología humana y animal

Resumen

En proceso patológicos clásicamente asociados con infección por herpesvirus un elevado número de casos quedan sin diagnostico etiológico. Este hecho sugiere que nuevos herpesvirus pudieran estar implicados en la etiopatogenia de estas enfermedades, la presente tesis doctoral plantea el desarrollo, optimización y evaluación de un método molecular genérico para detectar e identificar cualquier miembro de la familia hepesviridae, incluidos herpesvirus no descritos, basado en la amplificaron secuencial de un fragmento del exón 2 del gen de la subunidad atpasa de la terminasa oligonucleótidos degenerados, secuencias correspondientes. La aplicación de esta metodología en muestras clínicas obtenidas de pacientes inmunocompetentes con procesos infecciosos clásicamente asociados con infección herpesvirus, pacientes con procesos linfoproliferativos o neoplásicos, así como pacientes inmunodeprimidos, trasplantados y VIH-positivo, en los que cabe esperar la reactivación de herpesvirus latentes, no evidenció la presencia de nuevos herpesvirus. Sin embargo, esta misma metodología aplicada en muestras biológicas procedentes de diversos animales, sanos y enfermos, ha permitido la detección y caracterización de diez nuevos herpesvirus, cinco de ellos pertenecientes al género Cytomegalovirus y otros cinco al género Rhadinovirus. El análisis filogenético de las secuencias de nucleótidos y aminoácidos de dos de los nuevos Rhadinovirus, detectados en ungulados artiodáctilos, incluyó a ambos en el grupo de virus asociados con la fiebre catarral maligna, que, muy probablemente, constituirán el nuevo género Macarivurs en el próximo informe de clasificación del ICTV. Los ocho virus restantes fueron detectados en su totalidad en muestras biológicas de diferentes especies de murciélagos. Uno de ellos, de nuevo un Rhadinovirus, podrían estar asociado con la mortandad masiva del murciélago de cueva (Miniopterus schreibersii) detectada en Francia,