Análisis de genes de transportadores abc y mfs en fusarium verticillioides y su relación con la producción de fumonisinas

Resumen

En este trabajo se han aislado mediante DDRT-PCR (differential display) dos genes codificadores de transportadores ABC (fvabc) y MFS (fvmfs) que mostraban una expresión inducida en una cepa de Fusarium verticillioides productora de fumonisinas respecto a otra no productora. La secuencia de estos genes ha sido ampliada mediante RACE (rapid amplification of cDNA ends) para la caracterización de las secuencias genómica y codificadora así como de la secuencia de aminoácidos deducida. También se ha determinado la presencia de ambos genes, así como el del transportador del cluster de la biosíntesis de fumonisinas codificado por el gen fum19, en diferentes aislamientos de F.verticillioides productores y no productores de fumonisinas y en diferentes especies del género Fusarium, incluido el complejo de especies Gibberella fujikuroi, el número de copias en que se encontraban en el genoma y el prado de similitud entre sus secuencias. Los resultados indicaron que los transportadores fvabc y fvmfs se encuentran en el genoma de todas las cepas estudiadas, tanto productoras como no productoras. Por el cotnrario, efum19 sólo pudo ser detectado en aislamientos productores. En todos los casos, se encontraban como un única copia en el genoma. También se ha realizado un análisis filogenético incluyendo las secuencias de otros genes presentes en el GenBank. Por último, se ha analizado mediante RT-PCR a tiempo real la expresión de los genes en diferentes aislamientos de F.verticillioides productores y no productores de fumonisinas en condiciones de inducción de producción de fmonisinas y en condiciones control, así como en presencia de diferentes compuestos tóxicos. Los resultados sugirieron una implicación de ambos transportadores ABC en la expulsión de la toxina, y del FVABC en fenómenos de resistencia múltiple a drogas.