Caracterización de la expresión del gen ankk1 y de su proteína en modelo murino durante el desarrollo y en la edad adulta

Resumen

El polimorfismo TaqIA (rs1800497) ha sido ampliamente estudiado en una gran variedad de trastornos psiquiátricos y ha sido confirmada su relación con conductas adictivas y rasgos del aprendizaje. Tradicionalmente se ha considerado que esta relación e ra debida a que el SNP TaqIA es un marcador del gen DRD2, puesto que este gen se encuentra situado a 10 Kb de este polimorfismo. Posteriormente, el estudio de la secuencia de nucleótidos de esa región identificó el gen adyacente ANKK1, sobre el que s e encuentra TaqIA, y que podría codificar una RIP quinasa, donde este polimorfismo causaría la sustitución E713K, lo que podría afectar la función de esa putativa proteína ANKK1. Si éste es el caso, la caracterización bioquímica y molecular de esta n ueva proteína permitiría el conocimiento de la contribución del gen y de la proteína a los rasgos asociados al polimorfismo TaqIA. En la presente Tesis Doctoral se realizó un estudio in silico del gen ANKK1 que reveló la posible expresión de tres proteínas, que difieren entre si en la composición de los dominios funcionales: a) ANKK1 con un dominio RIP quinasa y un extremo C-t de repeticiones ankirina, b) ANKK1-quinasa, sólo con el dominio RIP quinasa y c) ANKK1-ankirina, sólo con el dominio de repeticiones ankirina. Nuestros análisis demostraron por primera vez que la proteína ANKK1 de mayor tamaño y la proteína ANKK1-quinasa, sólo con el dominio quinasa, se expresan en la edad adulta de forma constitutiva en todo el Sistema Nervioso Central y también en otros tejidos. Además se observó que la proteína ANKK1-quinasa se localiza en el citosol, y también en las membranas, asociada suavemente o en zonas resistentes a la acción de detergentes no iónicos a bajas temperaturas. Por otro lado, hemos demostrado que las proteínas ANKK1 se expresan en diferentes linajes celulares del Sistema Nervioso Central: en todo el encéfalo adulto, se localizan en los astrocitos y en los núcleos neuronales; y durante el neurodesarrollo, en las cél ulas de la glia radial. La expresión del gen ANKK1 y de sus proteínas es considerablemente mayor durante el neurodesarrollo que en etapas posteriores, por lo tanto se trata de proteínas implicadas en el neurodesarrollo cuya expresión persiste en la edad adulta. La expresión de ANKK1 está regulada de forma muy precisa durante las distintas fases del neurodesarrollo embrionario y postnatal a nivel genético y por modificaciones postraduccionales de sus proteínas, función reguladora que podría lle